比色法测定木荷树皮总皂苷的含量.pdfVIP

江苏农业科学2014年第42卷第2期 一281一 邓志勇，潘百明，陈兴田，等．比色法测定木荷树皮总皂苷的含量[J]．江苏农业科学，2014，42(2)：281—283 比色法测定木荷树皮总皂苷的含量 邓志勇，潘百明，陈兴田，梁昌祥，黄 宇 (贺州学院化学与生物工程学院，广西贺州542800) 摘要：建立了比色法测定木荷树皮提取物总皂苷含量的方法。研究香草醛一冰醋酸溶液浓度、高氯酸用量、反应 温度和加热时间对显色反应的影响，确定最佳比色条件为以7％香草醛一冰醋酸溶液和O．8mL高氯酸溶液作为显色 剂，显色温度为70℃，显色时间为25min，在550砌处测定吸光度。回归方程为，，=4．915茹+0．0832(r2=O．9996)， 线性可靠，曲线显著，精密度试验的艇渤为0．42％。该比色条件下测得木荷树皮提取物总皂苷含量为2．25％。该方 法操作简单、准确、稳定性较好，可用于测定木荷树皮提取物总皂苷含量。 关键词：木荷；皂苷；比色法；测定 中图分类号：0657．32文献标志码：A 文章编号：1002—1302(2014)02一0281—03 Gardn．et 1．2试验方法 木荷(鼬i啪s咿r6n ch锄p．)别称‘‘荷木’，属 山茶科常绿乔木。目前国内外报道木荷的化学成分主要有水 1．2．1检测波长的确定精确吸取对照品溶液(准确称取 解鞣质类、三萜及皂苷类、挥发油类、表儿茶素、a一菠甾醇 12lng皂苷标准品，加无水乙醇定容到50mL，配成 0．24 mL和供试品溶液(称取20 等。木荷皂苷具有抑制肿瘤细胞生长、驱虫作用¨。1；同时木 mg／mL对照品溶液)O．5 g mL无水乙 荷提取物对小菜蛾和菜粉蝶有较高的生长发育抑制作用、拒 木荷树皮，粉碎，称重，置于索氏提取器中，用100 食作用等H。J。但是目前还没有关于木荷皂苷提取工艺研究 醇回流10h；提取结束后趁热抽滤，并将提取液用旋转蒸发仪 的报道。皂苷的定量是皂苷研究利用的最大难题，皂苷本身 减压浓缩近干，得到流浸膏，将流浸膏用无水乙醇定容至 200 没有紫外吸收，也无专一性显色剂，直接测定难度很大。因此 IIlL。取用时再稀释10倍)0．5mL分别加入试管中，于 本试验对木荷树皮提取物中总皂苷含量的比色法测定工艺进 70℃水浴挥干溶剂。然后，依次加入7％香草醛一冰醋酸溶 行了研究，为木荷树皮中总皂苷的含量测定提供了快速、简 液0．2IIlL和高氯酸0．8mL，70℃水浴15IIlin，水浴后立即用 捷、准确的参考方法。 冷水冷却5IIlin，停止反应，再加入1．25mL冰醋酸，充分振 min。在波长400～700nm范围内扫描，分别得到 荡，静置lO 1材料与方法 皂苷标准品和木荷树皮提取液的可见光谱扫描图。 1．1试验材料 1．2．2标准曲线的测定准确称取5mg皂苷标准品，放入 50 1．1．1试验材料与试剂木荷树皮：采自广西壮族自治区桂 mL容量瓶中，再加入乙醇溶解，定容至刻度。准确吸取 林市临桂县宛田乡，自然晾干后，用高速多功能粉碎机粉碎， 0．4、0．6、O．8、1．0、1．2mL皂苷标准液置于试管中70℃水浴