液相色谱-串联质谱法测定牛奶中6种甲状腺拮抗剂残留.pdfVIP

第41卷 m 分析化学(F卧J)(I7AⅪIE)研究报告 第2期 2013年2月 ChiIleseJo啪alof 253～257 Anal如calChefIlis时 液相色谱-串联质谱法测定牛奶中6种甲状腺拮抗剂残留 邱元进 林永辉+ 杨方 张琼 苏芝娇 (福建出入境检验检疫局，福州350001) 摘要建立了牛奶中甲巯咪唑、硫脲嘧啶、甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、苯基硫氧嘧啶和2．巯基苯并咪唑 6种甲状腺拮抗剂残留的液相色谱一串联质谱分析方法。样品经乙腈沉淀蛋白后，上清液以衍生剂4一碘苄溴 HLB固 在pH=8．o下衍生2h，衍生液调节至pH=3．0，以乙酸乙酯提取。溶剂挥干后以20％甲醇复溶，0鹤is rIlL 相萃取小柱净化，4 50％甲醇一乙腈溶液洗脱，L叫a c。。色谱柱分离，乙腈和5mmol／L乙酸铵溶液(含O．2％ 甲酸)进行梯度洗脱，电喷雾正离子模式电离(ESI+)，多反应监测(MRM)模式检测，内标法定量。结果表明： 牛奶中6种目标物在优化条件下分离良好，响应值高，峰形尖锐对称，在5～100“g／l【g范围内呈良好的线性关 系，相关系数r2均大于O．99；检出限为0．14一O．32 pg瓜g，定量限为0．48—1．1“g瓜g；10，20和50¨g／l【g添加水 平的平均回收率为82．8％～113．6％，相对标准偏差2．4％一143％。 关键词 液相色谱一串联质谱(Lc—MsMs)；甲状腺拮抗剂；4．碘苄溴；残留 1 引 言： 2-巯基苯并咪唑(MBI)等。此类药物曾作为饲料添加剂被广泛使用，其主要作用是通过抑制甲状腺激素 分泌，增大动物的皮下组织、肌肉和肠胃对水分的吸收，达到增重的目的。但佻具有致畸和致癌作用“】， 食用残留此类药物的食品存在巨大的安全风险。因此，欧盟早在1981年即禁止此类药物用于动物产品圈。 TAs类药物极性强，在反相色谱中保留较弱，很难与杂质分离；且分子量小，质谱检测噪音高，硫脲 嘧啶及同系物同时存在多种互变异构体D】，以上因素均影响药物提取效率，并且在色谱分离过程中易形 成肩峰或分裂峰，干扰检测。液相色谱法Ⅳ1检测灵敏度过低，而液相色谱一串联质谱法”引则只在简单 基质中干扰较少。GB厂r 人体危害极大的巯基乙醇作为提取助剂。 由于直接检测TAs困难，研究者通过衍生化反应改善TAs检测灵敏度，目前此类方法主要有气相 色谱法陬101和液相色谱．串联质谱法【1卜13】。气相色谱法检测硫脲嘧啶同系物通常需要两次衍生化反应将 巯基和羟基封端，反应需溶剂转换，费时费力。液相色谱-串联质谱法仅需反应一次，灵敏度高，快速简 便。本研究利用TAs中的硫醇基在弱碱性条件下与4一碘苄溴(4一IBBr)发生亲核取代反应，生成硫醚， 建立了牛奶中6种TAs残留的超高效液相色谱一串联质谱检测方法。衍生化产物分子构型单一，稳定性 高，峰形尖锐对称；极性降低，在色谱中与杂质分离较好；分子量增大，远离质谱高噪音区，并且由于卤代 衍生物易离子化，可显著增强目标物的响应值和选择性。本方法快速简便、专属性强、灵敏度高，为其它 动物源性食品中TAs类药物检测提供了实用的方法。 2实验部分 2．1仪器与试剂 PromiIlence 4000 u?Lc高效液相色谱仪(ShimadzIl公司)；API Q11RAP三重四级杆质谱仪，配电喷 2012—06-2l收稿；2012—10．30接受 本文系国家质检总局科技计划(No．2012Ⅸ033)资助 ’E-mail：xmIllyh@163．com