各种培养液的配方.doc

各种溶液的配制基础公式 最终摩尔浓度 = 最初摩尔浓度/ 稀释倍数 稀释倍数 = 稀释后液体总量 / 需稀释液体量。 最初摩尔浓度 × 需稀释液体量 最终摩尔浓度 = 稀释后液体总量 例如，需稀释液体量 0.1ml, 浓度为1mmol/L, 最终稀释总量 4 ml , 最终的浓度0.025mmol/L 以配1000ml 液体为例, g = 分子量 * 摩尔浓度(M)(或mmol/1000) 配50ml 0.1mmol/L CaCl2为例 g = 147 * 0.5/1000 / 20(1000/50) 0.003675g 0.3mol/L 甘露醇 g = 182.2 * 0.3 /20(1000/50) 2.733g 或 X = 分子量 × 摩尔浓度（mol/L ）/ （ 1000/ 需要量） X = 分子量 × 摩尔浓度（mmol/L ）/1000 /（ 1000/ 需要量） 各种浓缩液的配制 1.FSH 浓缩液 FSH（中科院）规格10mg/瓶，用10ml水稀释，即1mg/ml。分装规格：250μl/管（即浓缩液），配50ml OM液时，加入浓缩液1管，即5μg/ml。 2．LH浓缩液 LH（宁波）规格200IU/管， 用2ml 水稀释，分装成8管。分装规格：25IU/管（即浓缩液）。配50ml OM液时，加入浓缩液2管，即0.5IU/ml。 3．17β-E2浓缩液 E2 2.5mg 溶于100μl 乙醇, 然后用25ml水稀释，分装成25管，分装规格：100μg/ml/管（浓缩液）。临用前，再分装成500μl/管，配50ml OM液时，加入浓缩液1管。 4．HMG浓缩液 HMG（ ），含有FSH / LH 75IU。用10ml无离子水稀释。7.5IU/ml/管(即浓缩液)。如配100ml OM时加入1管（1ml），即终浓度0.075IU/ml 。 5．Ca、Mg离子浓缩液 PBS（200ml）用Ca、Mg离子浓缩液100ml：称取CaCI2.2H2O 2.64g(100×)、MgCI2.6H2O 2g（100×），溶于100ml水中，0.0264g + 0.02g/ml CaCI2.2H2O/MgCI2.6H2O(浓缩液)。分装规格: 1ml/管。 PBS（200ml）用Ca、Mg离子浓缩液25ml：称取CaCI2.2H2O 0.66g(100×)、MgCI2.6H2O 0.5g（100×），溶于25ml水中，0.0264g + 0.02g/ml CaCI2.2H2O/MgCI2.6H2O(浓缩液)。分装规格: 1ml/管。配200ml PBS时，加入浓缩液1管。 SoF（50ml）用Ca、Mg离子浓缩液100ml：称取CaCI2.2H2O 1.26g(100×)、MgCI2.6H2O 0.5g（100×），溶于100ml水中，0.0126g + 0.005g/ml CaCI2.2H2O/MgCI2.6H2O(浓缩液)。分装规格: 1ml/管。 SoF（50ml）用Ca、Mg离子浓缩液25ml：称取CaCI2.2H2O 0.315g(100×)、MgCI2.6H2O 0.125g（100×），溶于25ml水中，0.0126g + 0.005g/ml CaCI2.2H2O/MgCI2.6H2O(浓缩液)。分装规格: 1ml/管。配50ml SoF 液时，加入浓缩液1管。配100ml SoF 液时，加入浓缩液2管 6．200 mM Glutamine （100×）浓缩液 Glutamine 2.922g 溶于100ml 水中。 7．0.05%胰蛋白酶 – 0.53mmol/L EDTA?4Na混合消化液— 0.004% EDTA混合消化液0.25％胰蛋白酶 一0.02％EDTA混合消化液 ??? 胰蛋白酶(Trypsin)粉????? ? 0.25g ??? EDTA粉???????????????????????????? .02g 0.01mol／L PBS????????????????????? 100ml先用少量PBS溶解胰蛋白酶，然后将EDTA粉末和剩下的液体加入混合，置37水浴中1小时左右(待彻底溶解，液体呈透明为止)，用G5抽滤，分装置4冰箱中保存。A23187（IA） A．1mmol/L浓缩液： 取1mg IA 用1.9ml DMSO 或DMSO/乙醇混合液溶解为1mmol/L浓缩液。应用时，用纯净水或培养液（无B