吸光光度法15.ppt

吸光度与光程的关系 A = ?bc 吸光度与浓度的关系 A = ?bc 为使反应完全，显色剂应过量。一 般由实验求得显色剂最适当用量。 二、显色条件的选择 1. 显色剂用量 显色反应：M + R MR 被测物 显色剂 有色物 2. 溶液酸度，既要防被测离子生成沉淀 又需防有色配合物离解。酸度还可影响逐 级配合物的组成。 例：Fe3+与磺基水杨酸的显色反应： pH = 2 ~ 3 Fe(ssal)+ 紫红色 pH = 4 ~ 7 Fe(ssal)2- 棕橙色 pH = 8 ~ 10 Fe(ssal)33- 黄色 Fe2+与邻二氮菲的显色反应： pH= 5~ 6 三邻二氮菲合铁(Ⅱ) 橙红色 温度，通过实验找出适宜的温度范围, 多数在室温下进行. 时间，在颜色稳定的时间范围内进行比 色测定。 溶剂，有机溶剂会降低有色物的离解度, 从而提高显色反应的灵敏度。 6. 干扰离子的消除 (1) 控制酸度，使干扰离子不显色。 (4) 分离干扰离子，用萃取、沉淀、电解、 离子交换等方法。 (2) 掩蔽剂 ，如用SCN- 测定Co2+时, Fe3+ 有干扰，加 入 F-， Fe3+ 被掩蔽。 Fe3+ + 6F- FeF63- ， (3) 改变干扰离子价态，测Ni2+时，Fe2+ 有 干扰，加入氧化剂， Fe2+ + e Fe3+ 15.4 测定条件的选择 一、选择合适波长的入射光 通常选?最大，例测KMnO4，选?最大 = 525 nm。但在有K2Cr2O7存在时，则应 选? = 545nm。 三、选择适当的参比溶液(空白溶液) 1. 纯溶剂空白： 试样、试剂、显色剂都无色时，用纯 溶剂(如蒸馏水)作参比。 测定溶液的吸光度时，需先用参比溶 液将仪器的T调节为100%(即A= 0.00)。其 目的是消去除待测物以外的物质的吸光度. 2. 试剂空白：试样无色，试剂、显色剂有 色，采用不加试样的空白溶液作参比。 试液空白 ：试剂、显色剂无色，试样中 其他共存组分有色，采用待测液作参比. ? 仅络合物有吸收，溶剂作参比。如 phen—Fe2+ 标准曲线。 ?.待测液也有吸收，被测液作参比。如 测汽水中的 Fe ?. 显色剂或其他试剂也有吸收，空白溶液作参比 例:邻二氮菲光度法测Li2CO3中的 Fe，参比溶液 为不含Li2CO3样品的所有试剂。 ?. 干扰组分与显色剂有反应,又无法掩蔽消时： 1）掩蔽被测组分，再加入显色剂，作参比。2）加入等量干扰组分到空白溶液中,作参比。 透光度读数的准确度是仪器精度的主 要指标。测定结果的精度常用浓度的相对 误差△c/c表示。 四、吸光度读数范围的选择 1. 读数误差 若△T=±1%，用不同的T(A)代入上 式，可得相应浓度测量的相对误差△c/c， 见表15-3, 作图见图15-13. T A ?c/c 0.90 0.046 10.6 0.80 0.097 5.6 0.60 0.40 0.20 0.10 0.222 0.399 0.699 1.00 3.26 2.73 3.11 4.34 准确度—仪器测量误差 光度计的读数误差一般为0.2～2％(ΔT),由于T与浓度c不是线性关系，故不同浓度时的ΔT引起的误差不同。 100 80 60 40 20 0 T% ?c1 ?c2 ?c3 ?T ?T ?T-透光率读数误差 c ?c1 c1 ?c2 c2 ?c3 c3 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0 2 4 6 8 T (2) T = 36.8%(A = 0.434)，相对误差最小。 T在65%~20% (A= 0.2~ 0.7)范围，相对 误差较小。 2. 控制吸光度在适宜的范围内(A= 0.2 ~0.7). (1) 控制溶液浓度。 (2) 选择不同厚度的比色皿。 15.5 比色分析和吸光度的测量 一、单一组分的测定 1. 目视比色法：用眼睛比较溶液颜色深 浅以确定物质含量. 系列标准溶液 待测溶液 观察方向 方便、灵敏，准确度差。常用于限