基因克隆专题.pptx

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2017-07-06 发布于湖北
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基因克隆专题

基因克隆专题;内容概要;基因克隆的目的;网上检索引物设计;连接克隆分类（以PCR产物克隆为例）;TA克隆;实验中考虑的因素;基因克隆系统的组分;基因克隆的几大要素; Taq、ES Taq、 Ex Taq、 Dream Taq DNA 聚合酶扩增产物为粘末端，可直接进行TA克隆 Phusion、PrimerStar、pfu DNA 聚合酶扩增的产物为平末端，不能直接TA克隆，可加A处理或平末端连接 Goldstart best Taq、Taq Plus、Long Taq、Taq Platinum DNA聚合酶产物为部分加A，可直接用于TA克隆，但克隆效率比Taq酶低，建议加A处理;目的DNA片段纯化;所用洗脱液量对回收效率的影响;DNA纯化常见问题及对策;DNA纯化常见问题及对策;回收DNA质量不好;基因克隆的几大要素;;载体与片段的摩尔比1:3-1:8;载体与片段的摩尔比1:3-1:8计算公式;基因克隆的几大要素;T4 DNA连接酶;连接体系;基因克隆的几大要素;感受态细胞;TA克隆-转化;重组子的鉴定方法;;内容概要;基因克隆常见问题之一;基因克隆常见问题之二;基因克隆常见问题之三;基因克隆常见问题之四