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Confocal Microscopy: Biorad: Leica Microsystems, Inc.: http://www.Ilt.de/ Nikon: / Olympus: /seg_section/seg_confocal.asp Optiscan Inc.: / Carl Zeiss Inc.: http://www.zeiss.de/us/micro/home.nsf Optical Coherence Tomography: LightLab Imaging: / Advanced Ophthalmic Devices: /Systems/prodsol.html Near Field Imaging: Thermomicroscopes: / Nanonics Imaging Ltd.: http://www.nanonics.co.il WITec Wissenschaftliche: http://www.witec.de Triple-O Microscopy GmbH: http://www.triple-o.de 第一节 光学显微镜 一、显微镜常用术语 明视距离 晶状体到像距离 25cm 机械筒长 镜筒管上沿到物镜旋转肩基的长度, 通常为 160mm 光学筒长 由物镜的上焦平面到目镜的下焦平面之间距离，略小于机械筒长。仪器标注数字一般为机械筒长。 二、基本光学参数 1.分辨率(Resolving Power) 在明视距离(25cm)能分辨清楚的尽可能近的两点的能力 0.61λ D=------------- n.sinè n.sinè = N.A (numerical aperture) ? if λ=527nm (White Light) , n=1.5 (oil) D ~0.2?m ? 2. 放大率(Magnification) 最终成像的大小与原物体大小的比值称为放大率。 总放大率= 物镜放大率×目镜放大率 物镜放大率 = Al / fo Al = 160mm(光) 目镜放大率 = 250mm / fe 3.焦点深度(Depth of Focus) 视野中垂直范围内观察到的界限 d = (k*n) / (M * N.A.) 4.工作距离(Working Distance , W.D.) 物镜表面到盖玻片的距离, N.A.也大,W.D.越小. N.A. = 1.4时 W.D. = 0.1mm 5.图像亮度和清晰度 亮度 I = [ NA ]2 / [ M ]2 和光源有关 清晰度 成像明显程度,除仪器外,和盖玻片性质和厚度有关 三、镜头符号含义 Splan 10 消色差种类 放大率 Splan 100 0.3 N.A. 1.25 oil 油浸 160/- 镜筒长度 玻片厚度 160/0.17 四、显微镜分类 光学显微镜有多种分类方法：按使用目镜的数目可分为双目和单目显微镜；按图像是否有立体感可分为立体视觉和非立体视觉显微镜；按观察对像可分为生物和金相显微镜等；按光学原理可分为偏光，相衬和微差干涉对比显微镜等；按光源类型可分为普通光、荧光、红外光和激光显微镜等；按接收器类型可分为目视、摄影和电视显微镜等。常用的显微镜有双目体视显微镜、金相显微镜、偏光显微镜、紫外荧光显微镜等。 1.相差显微镜 相差显微镜与普通显微镜主要不同之处在于用环状光栏 代替可变光栏，用带相板(phase plate)的物镜(通常用“ph”标志)代替普通物镜，并带有一个合轴调中望远镜(telescopd及滤色片。这些特殊装置能使活细胞或末 经染色的标本中各部分的折射率或厚度的微小差异，产生相位差，然后利用光的衍射和干涉的原理，把相差变成振幅(明暗)之差，使人的肉眼能够辨认出来。 应用： 观察未经染色的标本和活细胞的显微结构 2. 微分干涉差显微镜（DIC） 应用： DIC显微镜使细胞的结构，特别是一些较大的细胞器，如核、线粒体等，立体感特别强，适合于显微操作。目前像基因注入、核移植、转基因等的显微操作常在这种显微镜下进行。 3.偏光显微镜（Polarization microscopy） 原理： 和普通显微镜不同的是：其光源前有偏振片（起偏器），使进入显微镜的光线为偏振光，镜筒中有检偏器（一个偏振方向与起偏器垂直的的起偏器），这种显微镜的载物台是可以旋转的，当载物台上放入单折射的物质时，无论如何旋转载物台，由于两个偏振