拮抗TMV细菌发酵产物对TMV粒体形态的影响.pdfVIP

44 中国烟草学报 2007年12月第13卷第6期 拮抗TMV细菌发酵产物对TMV粒体形态的影响 申莉莉，王凤龙，钱玉梅，陈德鑫，吴惠惠，何京美 中国农业科学院烟草研究所，青岛市崂山区科苑经四路 11号266101 摘 要：通过对拮抗细菌发酵产物抑制TMV活性的测定及体外混合对 TMV粒体形态的影响研究，表明：1)拮抗细菌by33、by88发 酵产生的活性蛋白对TMV的体外钝化作用分别为85．38％和87．47％；2)电镜下观察到活性蛋白能打破 TMV粒体的规则排列，与 TMV粒子不可逆的结合，从而降低侵染力。 关键词：抗病毒蛋白；病毒粒体；抑制作用 中图分类号：$432．41 文献标识码：A 文章编号：1004．5708(20o7)06．0044．03 Effect of inhibitor protein fr0m TMV antagonistic bacteria on TMV panicles SHEN Li·li，WANG Feng—long，QIAN Yu—mei，CHEN De—xin，WU Hui—hui，HE Jing—mei Tobacco Research Institute of CAAS，Qingdao 266101，China Abstract：Research on inhibition of protein from antagonistic bacteria to TMV infection and the impact of two inhibitor proteins on TMV particles were carried out．Results showed that the two inhibitors from zymosis fluid had the passivation effects of 85．38％ and 87．47％ on TMV respectively．Samples mixed with the two inhibitors were found to destroy the regular array of virus particles under the electron microscope and the combinative mixtures were not reversible． Key words：antiviral protein；virus—particles；inhabitation effect 从烟田耕作层(15 cm)土样中分离到对烟草花叶 纯化TMV活体毒源NC89。 病有拮抗作用的菌株by33、by88，其分泌的抗病毒蛋白 1．2 试验方法 经过室内生测和作用方式的初步分析，认为能有效地 1．2．1 烟草花叶病毒精提液制备(硫酸铵沉淀法) j 钝化TMV粒子，与病毒粒子进行不可逆的结合，抑制 纯化的活体毒源NC89叶片100 g，研磨，离心去植 病毒体内复制，对病毒侵染具有预防作用。为进一步 株组织，按100 mL病毒澄清液加25 g硫酸铵的比例提 明确活性物质与TMV的作用机制，本试验提取菌株发 纯病毒。 酵产生的活性蛋白与提纯的TMV病毒液混合，进行透 1．2．2 拮抗细菌发酵活性蛋白液制备(硫酸铵沉淀 射电镜观察。 法) 。J及体外钝化作用测定 菌株by33、by88，经NB发酵培养2 d，离心、细菌过 1 材料与方法 滤器(0．25 m)除菌体，得无菌发酵液。取100 mL发 1．1 试验材料 酵液在冰水浴中加入56．1 g硫酸铵