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用RT-PCR和实时荧光RT-PCR检测诺沃克病毒的比较分析.pdf
中国卫生检验杂志2007年12月第17卷第12期 Chinese Journal of Health Laboratory Technology,Dec 2007;Vol 17 No 12 2171
【论著】
用RT—PCR和实时荧光RT—PCR检测诺沃克病毒的比较分析
杨洪,张海龙,冼慧霞,阳帆,何雅青 .
(广东省深圳市疾病预防控制中心,广东深圳 518020)
[摘要] 目的:研究用不同方法检测诺沃克病毒核酸的阳性率关系,为进一步完善诺沃克病毒核酸的实验室检测提供依
据。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)及实时荧光逆转录聚合酶链反应(real—time RT—PCR)两种方法,对
124例腹泻标本进行诺沃克病毒核酸的检测。结果:124份标本中,RT—PCR检出诺沃克病毒阳性31例,阳性率为25%;
实时RT—PCR检出阳性37例,阳性率为29.84%;两种方法均阳性的28例,均阴性的84例,符合率为90%;不同性别阳
性率无显著性差异;采用实时RT—PCR检测诺沃克病毒,敏感性较RT—PCR高,但两种方法的阳性率无统计学差异。
对于强阳性样本(C,值在20以内或电泳结果特异性条带很亮),两种方法检出率均为100%;对于弱阳性样本,则大部份
标本实时RT—PCR检出阳性而RT~PCR未能检出,少部份标本RT—PCR检出阳性而荧光RT—PCR未能检出。结论:
对于诺沃克病毒的实验室检测方法,首选实时RT—PCR;在可能的情况下,应该RT—PCR和实时RT—PCR两种方法联
用进行检测,以避免发生弱阳性样本漏诊的情况。
[关键词] 诺沃克病毒;急性胃肠炎;逆转录聚合酶链反应;实时荧光逆转录聚合酶链反应
[中图分类号] R373.2 [文献标识码] A [文章编号] 1004—8685(2007)12—2171—03
Comparative analysis of methods of RT——PCR and real——time RT——PCR for detection of
Norwalk —like virus
YangHong,ZhangHai·long,XianHui—xia, Fan,He Ya—qing
(Shenzben Center for Disease Control and Prevention,Shenzhen 518020,China)
I Abstract l objeetive:To improve the detective method of Norwalk—like virus and establish the database about the detection
in laboratory。we researched the positive rate of Norwalk~like virus RNA with different methods.nethods:Detected 124 diarrhea
samples with RT—PCR and the real—time fluorescent quantitative RT—PCR.Results:The positive detection rate of RT—PCR of
124 diarrhea samples was 25% .and tlle positive detection rate of real—time RT—PCR was 29.84%.The identieal positive sam.
ples were 28,and the identical negative samples were 84 of the 124 samples.the coincidence rate was 90%.There were no statis.
tical difference between male and female.Compared with RT—PCR.the sensitivity o
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