缺氧应激对HepG-2增殖活性和HIF-1α、MMP-2表达的影响.pdfVIP

第28巷 第4期 青 海 医 学 院 学 报 V()1．28 No．4 2007生 JOURNAL OF QINGHAI MEDICAL COLLEGE 2007 缺氧应激对HepG一2增殖活性和HIF一1 o【、 MMP一2表达的影响 卢根林 邓 勇! 樊海宁。 秦 伟 曹 越 张永健 格日力 『壬利! (1．青海大学医学院；2．青海大学附属医院普通卟二科) 摘 要 目的 研究缺氧应激对人肝癌细胞HepG一2增殖和缺氧诱导因子一1仪(HIF—l仪)、 基质金属蛋白一2(MMP一2)表达的影响。方法 将缺氧(5％0 、5％CO 、90％N )和常氧环境中 培养的HepG一2细胞，在相差显微镜下观察细胞形态变化；用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定 细胞增殖活性；用逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)法测定常氧组和缺氧4、l2、24h组HepG一2细 胞HIF—l仪mRNA和MMP一2 mRNA的表达量；用双抗体夹心酶联免疫吸附实验(ELISA)法测定 常氧和缺氧l2、24h组细胞培养上清MMP一2蛋白含量、结果 同时相缺氧组HepG一2细胞增殖 活性与常氧组比较，差异有统计学意义(P0．05) 常氧下HepG一2细胞不表达HIF—l canRNA， 缺氧4I1时HIF—l仪tuRNA表达量最高，随后下降(P0．01)，但仍高于常氧组；缺氧4 J1时MMP 一 2 tuRNA表达量最高，随后下降，但仍高于常氧组(P0．01)；缺氧组HIF—l仪mI{N．、和MMP 一 2 mRNA呈高度正相关关系。缺氧24 h组HepG一2细胞培养上清液中的MMP一2蛋白舍量与常 氧24 h组舍量比较，差异有统计学意义(P0．05) 结论 缺氧应激(5％0，)促进人肝癌细胞 HepG一2的增殖作用并上调HIF—l仪和MMP一2的表达量 关键词 缺氧应激 人肝脏癌细胞 增殖 缺氧诱导因子一l仪 基质金属蛋白酶一2 中图分类号 R364．4 R735．7 文献标识码 A EFFECTS OF HYPOXIA STRESS ON THE PROLIFERATION OF HEPG 一2 CELL AND EXPRESSIONS OF MMP一2 AND HIF一1 OL Lu Genlin ， Deng Yong ， Fan Haining： et al。 ， (1、Qinghai University Medical College； 2。The second department ot’General Surgery，the affiliated hospital of Qinghai University) Abstract Objective To investigate whether hypoxia stress enhanced the proliferation ot’hunlfl[1 hepatocellu一 ]ar carcinoma cell HepG一2 an‘l upregulated the expressions of matrix metallopl、oteinase一2 f MM1 一2)and hypox— ia—inducible factor一1仪(HIF一1仪)．Methods HepG一2 cell WaS euhured in hypoxia(5％0 ，5％CO，，90％ N2)alld normoxia incubatol ． Fhe morpological changes of HepG一2 cells were studied microscopically HFI(]the pro— liferatinn of HepG一2 were detected by methyl thiazolyl tetr