北京油鸡与AA肉鸡脂肪组织差异表达基因的研究.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１０，３０（３）：４０４５ ? 北京油鸡与ＡＡ肉鸡脂肪组织差异表达基因的研究  苗向阳 　冯浩咏 （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所　北京　１００１９３） 摘要　运用ｍＲＮＡ差异显示技术对ＡＡ肉鸡和北京油鸡脂肪组织基因的差异表达进行研究，从分子遗 传学角度分析导致两品种脂肪组织差异表达的原因，对了解性状形成的遗传基础和调控机理是十分必 要的。通过反Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交验证共筛选出脂肪组织差异表达基因１０条，经与ＧｅｎＢａｎｋ数据库进行相似 性比对，ＸＦ１与已知基因有较高同源性，该基因是人类ｃＤＮＡ全长开放阅读框（ＯＲＦ）的一段；ＸＦ２、ＹＦ１、 ＹＦ２及ＹＦ４经与ｎｒ数据库进行同源性比对，均可找到同源性较高的基因，但功能未知；ＸＦ４与克隆人类 胎盘ＣＬ０ＢＡ０１０ＺＦ０８基因的一段ｃＤＮＡ序列同源性为８３％；ＹＦ３与预测原鸡ＭＬＬ５（ＬＯＣ４１７７１２）基因有 一定的同源性，目前尚无功能报道；ＸＦ５和ＹＦ５与原鸡高迁移率族蛋白（ＨＭＧＮ３）有较高同源性；ＸＦ３在 ｎｒ库中未找到同源序列，确定为新发现的ＥＳＴ，提交数据库获得ＧｅｎＢａｎｋ登录号（Ａｃｃｅｓｓｉｏｎｎｕｍｂｅｒ： ＥＵ５９４５４９）。为进一步研究北京油鸡与ＡＡ肉鸡脂肪组织差异基因的功能与脂肪发育的关系奠定基础。 关键词　北京油鸡　ＡＡ肉鸡　差异显示　脂肪组织 中图分类号　Ｑ７８６ 　　不同品种鸡的脂肪组织存在很大差异，现代肉鸡 供了方便，已被广泛地应用于动物生理、动物胚胎和动物 品种的体脂中腹部脂肪含量很高，腹脂的过多影响肉 ［１５］ 遗传育种研究中，并取得了较大进展 。 鸡的胴体品质，降低饲料转化率和经济效益，地方品种 　　以北京油鸡（ＢｅｉｊｉｎｇＣｈｉｃｋｅｎ，Ｇａｌｌｕｓｇａｌｌｕｓ）和ＡＡ 腹脂含量较少，胴体品质较高。商品化肉鸡如ＡＡ肉鸡 肉鸡（ＡｒｂｏｒＡｃｒｅｓＢｒｏｉｌｅｒ，Ｇａｌｌｕｓｇａｌｌｕｓ）为研究素材，利 生长速度快，但抗应激能力较差；地方品种鸡如北京油 用ｍＲＮＡ差异显示技术对两品种脂肪组织差异表达基 鸡虽生长速度慢，但抗逆性强、肉质细致、肉味鲜美、蛋 因进行研究，讨论两品种间脂肪组织分子遗传水平上 质佳良、生活力强和遗传性稳定。 表达的差异，以期为进一步研究提供基础。 　　目前，各国研究人员都认为通过分子育种的方法 培育低脂肉鸡是解决肉鸡生产效率与产品品质矛盾的 １　材料与方法 有效途径。因此在基因组水平上研究 ＡＡ肉鸡与北京 １．１　主要试剂与仪器 油鸡两品种遗传物质的差异表达对了解性状形成的遗 　　ＲＮＡ酶抑制剂和不含 ＲＮＡ酶的ＤＮＡ 均购自 Ⅰ 传基础和调控机理是十分必要的。 ＴａＫａＲａ公司；反转录酶ＭＭＬＶ购自Ｐｒｏｍｅｇａ公司，ＥＺ 　　ＤＤＲＴＰＣＲ（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ＴＬｉｇａｔｉｏｎＫｉｔ购自康润诚业公司，总ＲＮＡ提取试剂盒 ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ）技术从基因的转录水平着手研 及总ＲＮＡ纯化试剂盒购自天根公司。 究基因的表达，能灵敏地用于检测在组织