白花蛇舌草激发肿瘤细胞产生超氧化物和激活半胱氨酸天冬氨酸.PDF

中西医结合学报２００６ 年 ９ 月第４ 卷第 ５ 期 　 JournalofChineseIntegrative Medicine， September２００６ ， Vol．４ ， No．５ · ４８５ · 白花蛇舌草激发肿瘤细胞产生超氧化物和激活 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶诱导肿瘤细胞凋亡 雅达赋，李少钦 （新加坡国立大学杨潞龄医学院， 新加坡 １１７５９７） ［摘要］ 　 背景与目的：白花蛇舌草是常用于抗肿瘤的中药之一。 实验研究和临床使用表明该药有明显的抗 肿瘤作用，但是该药抗癌作用的原理尚不清楚。 本文研究了白花蛇舌草的乙醇和水的提取物对人急性髓样 白血病细胞 HL６０ 生存和死亡的影响及其机制。 方法：我们用白花蛇舌草的提取物处理细胞，在处理后 ２ h 开始测量细胞内的超氧化物及各种半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase）的水平，并于２４ h测量细胞的生存及 凋亡情况。 结果：我们发现乙醇和水的提取物对 HL６０ 细胞的生存有较强的抑制作用。 对乙醇提取物的进 一步研究则表明该提取物能有效地激活caspase２ 和caspase３ 并诱发癌细胞凋亡。 乙醇提取物在较短的时 间（２ h）内诱导细胞产生超氧化物。 结论：白花蛇舌草乙醇提取物能有效地激发肿瘤细胞产生超氧化物并诱 导肿瘤细胞凋亡。 由于细胞内产生超氧化物能诱导细胞凋亡，我们认为白花蛇舌草的抗癌机制是通过激发 肿瘤细胞产生大量超氧化物，致使癌细胞内氧爆破，最终激活凋亡信号网络而使癌细胞凋亡。 ［关键词］ 　 白花蛇舌草； 肿瘤； 超氧化物； 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶； 细胞凋亡 ［中图分类号］ 　 R２８５ ．５ 　 　 ［文献标识码］ 　 A 　 　 ［文章编号］ 　 １６７２１９７７（２００６）０５０４８５０５ Evidencefor Oldenlandia diffusaevoked cancercellapoptosis through superoxideburstandcaspaseactivation SanjivKumarYADAV， ShaoChinLEE （YongLooLinSchoolof Medicine， NationalUniversityofSingapore， Singapore１１７５９７） ABSTRACT　 Background objective： Oldenlandiadiffusa （BaiHuaSheShe Cao） isoneoftheherbsmost commonlyusedintraditionalChinese medicinefortreating cancer． Variousstudiesusingtheherbaloneorin combination withothertherapyplanshave evidencedtheeffectiveness ofthe herbinthe managementof cancersofdifferenttissueorigin． However， the mechanismsunderlyingitsanticanceractivityareunknown． Inthepresentstudy， weattemptedtoinvestigatetheapoptoticactivityofcrude extractsoftheherbas well asthepossible molecularpathways． Methods： Weincubated human promyelocyticleukemiacellline HL60 cellswithethanoloraqueousextractsoftheherb， anddeterminedthelevelsofintracellularsuperoxideat2 and4hoursaswellascaspaseactivityat3， 6and8hoursusingphotospectrometry． Cancercellsurvivaland apoptosis werequantifiedat24hoursbyusing MTTandflow cytometryanalysesrespectively． Results： We foundthatitdosedependently inhibited the cancer cell growthin MTT assay． Flow cytometry analysis revealedthatitelicitedsignificantproductionofsub