本科生毕业论文(设计).ppt

蛋黄卵磷脂提取方法的研究 指导教师：林松毅 副教授 学生姓名：黄金枝 学 院：军需科技学院 答辩日期：2009年6月5日 研究背景和意义 近年来卵磷脂被誉为与蛋白质、维生素E并列的“三大营养素”倍受社会关注 ，需求量也日益增大。 传统的有机溶剂法是目前应用最广泛的提取方法，但此法所得卵磷脂产品一般纯度不高。 为适应大规模工业生产的要求，开发研究步骤简单、提取率高、有机溶剂残留低、生产成本低的卵磷脂提取方法十分必要 。 研究内容 一、蛋黄卵磷脂溶剂法提取 实验材料 蛋黄粉：北京金键力公司生产； 乙醇、丙酮试剂：分析纯，由北京化工厂生产； 实验设备 AG204M型分析天平：ETTLER TOLLEDO公司； HJ-6型多头磁力加热搅拌器：江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司； SHZ-D（Ⅲ）型循环水式真空泵：巩义市予华仪器有限责任公司； R1002型旋转蒸发仪：巩义市英裕高科仪器厂； DZMK-D型水浴锅：余姚市东方电工仪器厂； DZF-6050型真空干燥箱：上海博讯实业有限公司医疗设备厂。 实验方法 蛋黄卵磷脂生产工艺流程： 蛋黄粉与丙酮的料液比对提取率的影响 丙酮浸提时间对不溶物得率的影响  乙醇与丙酮不溶物料液比对卵磷脂得率的影响 乙醇浓度对卵磷脂得率的影响 萃取时间对卵磷脂得率影响 2. U10（104）均匀设计实验方案 U10（104）优化蛋黄卵磷脂提取最优工艺条件的结果与分析 二、蛋黄卵磷脂HPLC分析方法 试验材料 卵磷脂，吉林大学营养与功能食品实验室提供； 试验试剂 卵磷脂标准品：色谱纯级，美国SIGMA公司生产； 甲醇、乙腈：色谱纯级，美国DIMA公司生产； 超纯水：由0.45um滤膜过滤备用。 试验设备 LC-2010A型岛津高效液相色谱仪：日本岛津公司生产； 752PC型紫外可见分光光度计：上海光谱仪器有限公司生产； 2XZ-1型旋片式真空泵：浙江黄岩生产； DZF-6050型真空干燥箱：上海博迅生产； MILLIPORE牌超纯水机：美国生产； BUCHI R-250旋转蒸发仪：瑞士生产。 试验方法 卵磷脂HPLC色谱条件： 色谱柱：Lichrosorb si60柱； 流动相：甲醇-乙腈-水（60：30：10)； 流速：1ml/min； 柱温：40℃； 检测波长：206nm。 1.卵磷脂标准工作曲线的绘制 精密称取卵磷脂标准品10.0mg，置10ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀得对照品溶液（1mg/ml）。将对照品溶液在紫外可见分光光度计下进行波谱扫描，记录其特征峰值（206nm）。用微量进样器分别吸取不同体积（1、2、3、4、5、6μl）的标准品溶液进样，以进样量为横坐标，峰面积为纵坐标绘制卵磷脂标准工作曲线。 卵磷脂标准工作曲线测定结果 用最小二乘法作线性回归，制得的卵磷脂含量与峰面积的标准回归方程为y=7.502701e-004x -37.97849， 相关系数R=0.9992173，说明线性关系良好 3.HPLC的方法学验证实验 HPLC的方法学验证实验 精密度及稳定性实验： 精密吸取对照品溶液5μl按色谱条件进样5次，每次进样5μl，测定卵磷脂峰面积大小。 从表3中可以看出，RSD（%）值为2.4%，说明本方法的测量数据之间接近程度高。由于精密度试验是在每隔20分钟左右进样检测一次，所以同时考察了标准品不同时段的稳定性试验，由结果可知，本试验的样品在一定时间内较稳定。 HPLC的方法学验证实验 精密度及稳定性实验： 从表4中可以看出，RSD（%）值为2.06%，说明本试验的样品在一定时间内较稳定。 HPLC的方法学验证实验 重现性实验： 精密吸取样品溶液5μl按色谱条件进样5次，每次进样5μl，测定卵磷脂峰面积大小。 重现性实验结果见表5，RSD=2.58%，说明此方法可靠，重现性良好，样品的检测受环境的因素影响较小。 HPLC的方法学验证实验 加样回收率实验： 精密量取已知卵磷脂含量的样品溶液0.2、0.2、0.3、0.3、0.4、0.4ml（6份），加放一定量标准品，按色谱条件进样6次，测定峰面积，计算加样回收率。 加样回收率实验结果见下表，回收率结果为98.65%~104.33之间，RSD=2.27%，说明此方法可靠，回收率好。