现代分析测试技术8.ppt

色谱-四极杆质谱仪结构示意图 现代分析测试技术—质谱技术 LC-MS大气压电离技术（API） （1）电喷雾电离（ API Electrospray） Rayleigh Limit Reached + + + + + + + + + + - - - - - + + + + + + + + + + - - - - - + + + + + + - - + + + + + + - - Evaporation + + Charged Droplets 试样离子 准分子离子 Analyte Ions Solvent Ion Clusters Salts/Ion pairs Neutrals + + + + + + + + - - 其他离子 现代分析测试技术—质谱技术 流出液在高电场下形成带电喷雾，在电场力作用下穿过气帘； 气帘的作用：雾化；蒸发溶剂；阻止中性溶剂分子 现代分析测试技术—质谱技术 Capillary-HPLC/CE/ESI-MS System 现代分析测试技术—质谱技术 系统结构示意图 现代分析测试技术—质谱技术 现代分析测试技术—质谱技术 生物质谱（Biomass Spectrometry) 1.新的离子化技术 电喷雾质谱技术和基质辅助激光解吸附质谱技术的诞生。这两项技术的出现使传统的主要用于小分子物质研究的质谱技术发生了革命性的变革。它们具有高灵敏度和高质量检测范围，使得在pmol（10-12甚至fmol（10-15的水平上准确地分析分子量高达几万到几十万的生物大分子成为可能，从而使质谱技术真正走入了生命科学的研究领域. 2.各种色谱技术联用 GC/MS, HPLC/MS, TLC/MS 和CZE/MS等。 现代分析测试技术—质谱技术 生物质谱技术的应用 肽和蛋白质分析 糖蛋白、糖肽和糖质量测定 肽的测序 蛋白质中胱氨酸和胱氨酸残基的定位 蛋白磷酸化定位 肽指纹图谱测定 对蛋白酶解或降解后所得多肽混合物进行质谱分析的方法，对质谱分析所得肽片与多肽蛋白数据库中蛋白质的理论肽片进行比较，从而判别所测蛋白是已知还是未知。由于不同的蛋白质具有不同的氨基酸序列，因而不同蛋白质所得肽片具有指纹的特征。 现代分析测试技术—质谱技术 现代分析测试技术—质谱技术 核酸的质谱分析 ESI和MALDI质谱技术为寡核苷酸及其类似物的结构和序列分析提供了一种新的方法，它是将被测寡核苷酸样品先用外切酶从3’或5’端进行部分降解，在不同时间内分别取样进行质谱分析，获得寡核苷酸部分降解的分子离子峰信号，通过对相邻两个碎片分子质量进行比较，可以计算出被切割的核苷酸单体分子质量，将其与四个脱氧苷酸的标准分子量进行对照，就可以读出寡核苷酸的序列。由于MALDI技术分辨率的问题，使得其更适合于减基数较少的短链核酸的分析。 现代分析测试技术—质谱技术 质谱与临床医学 ??? 除了应用于蛋白质和核酸研究以外，质谱还以其灵敏度和高分辨率在临床医学检直中得到了广泛的应用，如对药物代谢产物的动态分析，癌细胞蛋白质的鉴定，同位素标记物的检测等。其中用同位素14C标记的14C-尿素呼吸试验和15N标记的15N-排泄试验已成为临床检测胃幽门螺杆菌（HP）的有效手段。 现代分析测试技术—考试安排 考试时间：2012年1月5日（周四）下午1：00-3：00 考试地点：闵行校区第三教学楼115教室 考试形式：闭卷考试 考试题目： 一、简单论述下列测试技术的原理和应用领域 二、论述现代测试技术在您所学专业中的发展和贡献 现代分析测试技术 主讲： 何品刚 现代分析测试技术—质谱技术 质谱是由J.J.Thomson在上世纪1906年发明了质谱，并由Aston在1919年制成了世界上第一台速度聚焦型质谱仪，成为质谱发展史上的里程碑。 质谱本质上是一种物理方法，它与化学分析法及计算机技术相结合，可解决大量的化学分析问题。 质谱是带电原子、分子或分子碎片按质荷比（或质量）的大小顺序排列的图谱。 质谱仪是一类能使物质粒子离子化并通过适当的电场、磁场将它们按空间位置、时间先后或者轨道稳定与否实现质荷比分离，并检测强度后进行物质分析的仪器。 第十章 质谱 (MS) Mass Spectroscopy 主要因为发展质谱技术和方法而获诺贝尔奖的科学家有: J. J. Thompson (物理1906，发明质谱技术并用以研究气体的电导)， F. W. Aston (化学1922，用质谱仪发现了非放射性元素的同位素)， W. Paul (