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第三章 酶反应动力学 中间产物学说 第一节单底物酶促动力学 第二节双底物酶促反应动力学 第三节 酶反应影响因素 第一节单底物酶促动力学 单底物酶促动力学 只有初速度才是酶的反应速度，原因： （1） 底物随反应时间的延长减少； （2） 酶随反应时间的延长受速度、pH的影响，酶部分变性； （3） 随时间延长，产物增加，产物对酶的抑制作用； （4） 产物增加，逆反应速度增加。 因此，只有初速度才是酶的反应速度。 二、底物浓度对反应速度的影响 1、单底物酶促反应动力学 （1））米氏方程（Michaelis－Menten equation 米氏常数（Michaelis-constant）的意义 a? Km的物理意义 当V＝1/2Vmax时的底物浓度，为Km的物理意义。 即［S］＝Km Km单位：m(mol)/L b? Km是酶的特征性常数 不同酶,Km是不一样的。 底物种类，pH（opt）,T（opt） 要定下来。 （E） A＋B ? C＋D 此酶有4个Km值 Understanding Vmax The theoretical maximal velocity Vmax is a constant Vmax is the theoretical maximal rate of the reaction - but it is NEVER achieved in reality To reach Vmax would require that ALL enzyme molecules are tightly bound with substrate Vmax is as symptotically approached as substrate is increased 第二节双底物酶促反应动力学 双底物双产物反应 第三节 酶反应影响因素 温度的影响 酶的最适温度（optimum temperature） 温度影响的两个方面 : 1.温度升高，酶反应速度增加 在达到最适温度之前提高温度，可以增加酶促反应的速度。 pH的影响 非特征性常数，只在一定情况下才有意义。 ?1、? 最适pH 当酶反应速度受pH影响，当某个pH，酶表现最大活力，此pH就是pH（opt）。 pH（opt）不是酶的特征性常数，受测定环境的影响很大。 ??2、 pH影响的原因 （ 1）? 影响酶的构象（过酸过碱引起酶构象的变化，使酶失活） （ 2）? 影响酶与底物的解离 5、下列哪一项不是Km值的功能 （A）Km值是酶的特征性物理常数，可用于鉴定不同的酶 （B）Km值可以表示酶与底物之间的亲和力，Km值越小，亲和力越大 （C）Km值可以预见系列反应中哪一步是限速反应 （D）（答案）比较Km值可以估计不同的酶促反应速度 6、 一个简单的米氏酶促反应，当[S]远远小于Km时 （A）反应速度最大 （B）反应速度难以测定 （C）（答案）底物浓度与反应速度成正比 （D） [S]增大，Km值也随之变大 c 在一定条件下，Km表示酶与底物的亲和力 有些酶有很多底物，Km值最小的底物叫此酶的最适底物，也叫酶的天然底物。 d 已知Km，可以求出V/Vmax与底物浓度[S]的关系。 测定Km的意义：（以上4点） Understanding Km Km is a constant derived from rate constants Km is, under true Michaelis-Menten conditions, an estimate of the dissociation constant of E from S, because at equilibrium, Reversible reaction, dissociation constant is So small Km means tight substrate binding; high Km means weak substrate binding. Km equals to the substrate concentration at which v=1/2vmax k1 k-1 米氏常数的测定 双倒数作图法，即 Lineweaver-Burk法。 1/V对1/S作图 A+B P+Q 双底物双产物的反应按动力学机制可分为两大类 : 双底物 双产物的反应 序列反应 （sequentia