第三节 胚胎移植.ppt

胚胎移植 生化学院 万红玲 一、胚胎移植的概念 是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 胚胎移植成功的标志是什么？ 移植的胚胎要能够在受体内正常发育并分娩。 二、胚胎移植的生理学基础 三、胚胎移植的基本程序 1、对供、受体母畜进行选择，并进行同期发情处理。 供体公、母牛应该是具有人类所需的优良遗传性状的个体，而受体母牛必须具有正常的孕育、生殖后代的能力。 胚胎移植时，供体胚胎必须与受体子宫内膜发育状态高度同步化，才能获得好的效果，这个过程称为同期发情（oestrus ynchronization），包括自然同期发情和人工同期发情。 自然同期发情即不经任何药物处理，依靠动物自身的性周期规律，选择处于适当时期的母畜作为受体。 实际操作中，多用性激素进行人工同期发情。 2、配种或人工授精 3、冲卵，收集胚胎 对配种或授精后的供体母畜，经过一段时间就要进行胚胎的收集。其具体操作方法是用配制好的冲卵液，借助特制的冲卵装置，把位于子宫或输卵管的胚胎冲洗出来，也称冲卵。冲胚胎的时间一般在配种或授精后3～8天进行，这时的胚胎已发育到4～8个细胞以上。 胚胎质量检查 形态学标准进行检测：首先看胚胎的外形，要求形态正常，卵裂球均一，透明带完整。其次要鉴别采卵时间是否与胚胎发育时期相吻合。如果发育时间落后于采卵时间，则胚胎本身可能有问题。 也可以用0.5％的台盼蓝对胚胎做染色处理，活细胞是不被着色。一般有一半以上卵裂球着色的胚胎发育能力较差。 4、胚胎移植 手术移植 非手术移植 四、胚胎移植的意义 1、加速育种工作和品种改良 2、大量节省购买种畜的费用 3、一胎多产 4、保存品种资源和濒危物种 5、可充分发挥优秀个体的繁殖潜能 缩短繁殖周期，增加一生繁殖的后代数量 第四节 胚胎分割 胚胎保存（自学） 1901年，Spemann最早开始进行动物嵌合体的研究，他进行了蛙嵌合个体的培育，其目的是为了研究两栖类动物的发育机制。 1960年，Mintz开始研究嵌合体制作技术，到1965年第一次获得活至成体的正常小鼠嵌合体。 * 湖北生态工程职业技术学院生物工程系 * * 湖北生态工程职业技术学院生物工程系 * 回顾 第一节 体内受精和胚胎早期发育 第二节 体外受精和早期胚胎培养 第三节 胚胎移植 第四节 胚胎分割 第五节 胚胎嵌合 第七章 胚胎工程 天价牛肉 千元一斤有钱还难买 日本神户牛肉（雪花牛肉） 手图 胚胎工程其他技术的最后一道“工序” ------胚胎移植 如何使移植的胚胎在受体的子宫内能正常发育并分娩？ 将胚胎移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内。 1、供体和受体相同的生理环境 2、早期胚胎处于游离状态,为胚胎的收集提供了可能 3、受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥 4、胚胎与受体建立正常的联系,但遗传物质没有改变 选择 供体母牛 受体母牛 ……同期发情处理…… 超数排卵 供体公牛 配种/人工授精 冲卵 收集、质量检查、培养或保存 胚胎移植 妊娠检查 分娩（胚胎移植的犊牛） . 多能、专能. 囊胚 桑椹胚 卵裂球 胚胎分割的原理 根据卵裂球具有发育成为一个个体的全能性的特点，人们就考虑用这种实验技术，生产同卵双胎或多胎，以加速优良种群的繁殖。？？？ 胚胎的分割在不同时期有不同的分离培养方法，如卵裂球分离培养法、致密化前各期胚胎分割法、桑椹胚至囊胚期胚胎分割法等。 卵裂球分离培养 卵裂球分离培养是将桑椹胚以前的卵裂胚去掉透明带，分离每个卵裂球，将其包埋于琼脂中，将包有卵裂球的琼脂柱，移到中间受体小鼠或兔的输卵管中，经数日活体内培养后，再取出已经发育到多细胞的胚胎，移于受体子宫。 这种方法已经在牛、羊、马生出同卵多胎。 对研究卵裂球位置与分化方向以及研究嵌合胚、不同卵裂球遗传性等，都是一种很有用的技术。 致密化以前各期的胚胎分割 对于致密化以前各期的胚胎，由于卵裂球之间彼此尚未建立起紧密联系，分割时较容易进行。根据胚胎的直径，制作适宜口径的固定吸管和吸取卵裂球用的微吸管。在显微操作仪上，用固定吸管固定住胚胎，然后用微玻璃针自上而下切开透明带，使其成为一个切口。将微吸管自切口处伸入，吸住半数卵裂球，慢慢取出，这样即可以把胚胎一分为二。把吸出的半胚或卵裂球，纳入空透明带中。空透明带是将废弃的卵母细胞或不合适的胚胎，去除其内容物即可。然后将分割后的胚胎包入琼脂柱，通过中间受体培养。依照同样的方法，可以将胚胎分割成为四或八分胚。 桑椹期的胚胎分割 用微玻璃针或微刀进行分割，无需固定吸管，由于透明带韧性较强。 切割之前需要对其进行软化处理，处理标准是：4－