第二章 薄层色谱.ppt

第二章 薄层色谱 1.　吸附剂的选择和制备： ⑶　聚酰胺： a. 冰醋酸法： 第二章 薄层色谱 1.　吸附剂的选择和制备： ⑶　聚酰胺： b. 浓盐酸法: 第二章 薄层色谱 1.　吸附剂的选择和制备： ⑷　葡聚糖凝胶： 凝胶可将分子大小和形状不同的物质分离，好象用过筛的方法把大分子与小分子分开一样。因此凝胶又称为凝胶分子筛。葡聚糖凝胶是一种广泛应用的凝胶，它是由一定分子量的葡聚糖悬浮于有机相中，再加入交联剂表氯醇使葡聚糖交联聚合而成（可直接购买商品使用）。它适用于蛋白质、多糖等大分子物质的分离和提纯。 可分离的分子量范围从几百到几十万不等。 第二章 薄层色谱 2.展开技术: ⑴ 展开剂的选择（技术关键，对分离效果影响最大）： 　　根据样品的极性，溶解度以及吸附的活性等因素来选择展开剂。 原则１：展开剂对被分离物质有一定的解吸能力（否则，不能将Ａ解吸下来，Ａ会待在原点不动），但又不能太大（否则，Ａ不被吸附，而是跟着Ｓ一起跑，达不到分离的目的）；展开剂的极性应略小于被分离物质。 原则２：展开剂对被分离物质有一定的溶解度（否则，被顶出的Ａ不溶于Ｓ，就不会随着Ｓ向前移动）。 第二章 薄层色谱 2.展开技术: ⑴ 展开剂的选择 　　实际操作时，可参考下列溶剂的洗脱能力顺序： 　　硅胶板上：乙腈＞二氧六环＞丙酮＞乙酸乙酯＞乙醚＞二氯甲烷＞氯仿＞苯＞四氯化碳＞戊烷 　　氧化铝板上：乙酸＞甲醇＞异丙醇＞吡啶＞乙腈＞二甲亚砜＞乙酸乙酯＞二氧六环，丙酮＞二氯乙烷＞四氢呋喃＞二氯甲烷＞氯仿＞乙醚＞苯＞甲苯＞四氯化碳＞环己烷＞石油醚＞戊烷 第二章 薄层色谱 2.展开技术: ⑴ 展开剂的选择 　　说明: ①实际工作中，某些溶剂的顺序会有颠倒出入，所以以上顺序只作参考。 ②实际工作中, 更常用到二元、三元混合溶剂作展开剂，这时可参考有关资料。（例如，分离氨基酸时，可找有关氨基酸分离的资料）利用资料上报导的展开剂试验时，往往还要经过实验来确定合适的展开剂。 第二章 薄层色谱 2.展开技术: ⑵ 展开方式:　 a. 上升法: 适用于硬板。 b. 倾斜上升法: 适用于软板。 c. 下降法: 此法受重力影响，展开速度较快，但有时前沿不整齐。 d. 双向展开: 使用方形玻板，样品点在角上，先用一种展开剂展开，将玻板转动90°后,再用另一种展开剂展开。此法适用于较复杂的样品。 第二章 薄层色谱 3. 显色技术: ⑴ 蒸汽显色: 　　 碘、溴、浓氨水等，放在干燥器中; 薄板挥去展开剂，放在上述干燥器中，显色时间与灵敏度随化合物而异。 　　 碘遇有机物显黄－黄棕色斑点，拿出后迅速用铅笔画下斑点的形状及位置。 第二章 薄层色谱 3. 显色技术: 多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点，这种反应有可逆及不可逆两种情况。 前者在离开碘蒸气后，黄褐色斑点逐渐消退，并且不会改变化合物的性质，且灵敏度也很高，故是定位时常用的方法； 后者是由于化合物被碘蒸气氧化、脱氢增强了共轭体系，因此在紫外光下可以发出强烈而稳定的荧光，对定性及定量都非常有利。 * 第二章 薄层色谱 色谱分离法是目前有机分析中使用最多，最有效的分离方法，许多化学物理性质相似的异构体、同系物以及多组分混合物的样品往往难以用简单的蒸馏、精馏、萃取、重结晶、升华等简单手段分开，而用色谱方法却能得到快速、准确的分离及测定。 第二章 薄层色谱 　什么是色谱方法(Chtomatography)? 最初，1903年，M.C.Цвег把干燥的叶子用石油醚萃取后，将小量的萃取液倾入充填有沉降碳酸钙的玻璃柱子的顶端，然后用石油醚淋洗，结果叶中的色素在碳酸钙柱上互相分离，形成不同颜色的色带，分列在柱上；随着淋洗液的流动，色带的分离越加明显。他把这种方法叫做“色谱法”，色谱的英文名称是chromatograph，它是由希腊文chromos和grapho两字并合而成，字面上意义是颜色的记录。 第二章 薄层色谱 　什么是色谱方法(Chtomatography)? 第二章 薄层色谱 可以说茨维特在色谱方面做了开创性的工作，但以后的二十几年并未引起很多人的注意，直到1931年有人用充填氧化铝粉末的柱管将性质非常相似的α-胡萝卜素和β-胡萝卜素分离成功（在此之前，人们一直以为胡萝卜素是一种纯物质），并且得到的纯物质可做Ｃ、Ｈ元素定量分析用，这才引起了许多有机化学工作者的注意，认识到色谱法在分离混合物方面有广阔的前景，并且研究出许多新技术，例如分配色谱法、纸上色谱法、薄层色谱法、离子交换色谱法等。 第二章 薄层色谱 　 现在，人们所说的“色谱”一词的含义已经远不是茨维特所发现的那种色带，而是根据混合物中各组分在互不相