细胞生物学总复习.doc

1绪论 细胞生物学：从细胞的显微、亚显微和分子三个水平研究细胞结构、功能和各种生命活动规律的科学。由细胞学发展而来。 细胞cell：能进行独立繁殖的有膜包围的生物体的基本结构和功能单位。一般由质膜、细胞质和核（或拟核）构成，是生命活动的基本单位。 明了世界上第一台光学显微镜,并利用这台显微镜首次观察到了血红细胞 1975 德国G.J.F.Kohler，阿根廷C.Milstein 丹麦N.K.Jerne发展单克隆抗体技术。 或： 五个时期，细胞质的发现、细胞学说的建立、细胞学的经典时期、实验细胞学时期、细胞生物学时期 2细胞生物学研究方法 分辨力resolution：又称分辨本领，指将临近两点清晰区分辨认的能力，分辨物体最小间隔的能力。 原代培养primary culture：培养直接来自动物机体的细胞群。 细胞株cell strain：从原代培养细胞群中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。 细胞系cell line：从肿瘤细胞培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，可无限繁殖。 克隆clone：亦称无性系。只有同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。 光学显微镜（正置、倒置、荧光）、电子显微镜（扫描、透射）的成像原理 光学显微镜：利用凸透镜的成像原理，由目镜与物镜共同组成光学成像系统。 倒置inverse microscope：物镜（载物台下）与照明系统（载物台上）颠倒。 荧光fluorescence microscope：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜。有两个特殊的滤光片。照明方式通常为落射式。 电子显微镜： 透射transmission electron microscope，TEM：D=0.2mm。以电子束作光源，电磁场作透镜。电子束的波长短，并且波长与加速电压(通常50~120KV)的平方根成反比。 扫描scanning electron microscope，SEM：D=6-10nm。极细的电子束扫描样品，在样品表面激发出次级电子，次级电子的多少与样品表面结构有关，次级电子由探测器收集，信号经放大用来调制荧光屏上电子束的强度，显示出与电子束同步的扫描图像。 电镜标本的制备方法 透射电子显微镜TEM：取材、固定、脱水、包埋、切片、染色、观察。 扫描电子显微镜SEM：取材、清洗、固定、脱水、干燥、镀膜、观察。 激光共聚焦显微镜的原理是什么？ 激光共聚焦显微镜（laser confocal scanning microscope，LCSM）：以单色激光为光源，使样品被激发出荧光，利用计算机进行图像处理，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。由于照明孔与检测孔相对于物镜焦平面是共轭的，焦平面上的点同时聚焦于检测孔和照明孔，焦平面以外得点不会再检测孔处成像，从而得到清晰的象。 流式细胞仪工作原理是什么？ 流式细胞仪（flow cytometer）：包在鞘液中的细胞通过高频振荡控制的喷嘴，形成包含单个细胞的液滴，在激光束的照射下，这些细胞发出散射光和荧光，经探测器检测转换为电信号，送入计算机处理，输出统计结果。并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群，分离纯度可达99%。 免疫组化的原理是什么？ 免疫组化（immunocytochemistry）是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究真核生物rRNA前体中含有插入顺序，rRNA前体要形成成熟的rRNA，需要经过拼接反应。起始过程是GTP在插入顺序5’端发生亲核反应，同时GMP与5’端切点的切除段形成磷酸二酯键并使原RNA断开。第二步是5’切点的外元3’-OH与3’切点的外元5’-P共价连接，获得成熟的rRNA，被切除部分最后环化，形成一个环状结构，同时从5’端去掉核苷酸啐片。剩余部分连接成核苷酸的环状产物，再经过几步，最后切下一个19个核苷酸的线性内含子序列即L-19，它具有催化活性，上面的剪接作用，是由内含子本身的催化性质决定的原核生物的核糖体所含的rRNA有5S、16S及23S三种。5S含有120个核苷酸，16S含有1540个核苷酸，而23S含有2900个核苷酸。而真核生物有4种rRNA，它们分子大小分别是5S、5.8S、18S和28S，分别具有大约120、160、1900和4700个核苷酸。 rRNA是单链，它包含不等量的A与U、G与C，但是有广泛的双链区域。在双链区，碱基因氢键相连，表现为发夹式螺旋。 、 4线粒体氧化过程中电子的传递过程，氧化磷酸化偶联的机制 线粒体内膜上的电子传