果核微量生物物证DNA检材提取方法的考量.pdfVIP

中国法医学杂志 CHIN J FORENSIC MED 2016 第31 卷第6 期 • 经验交流• 果核微量生物物证DNA 检材提取方法的考量 1,2 1 马秀梓 ，孙润广 1. 陕西师范大学物理学与信息技术学院 陕西西安 710062 2. 宁夏吴忠市公安局刑侦支队 宁夏吴忠 751100 （ ， ； ， ） 【关键词】法医物证学；微量生物物证；DNA 检验 【中图分类号】DF795.2 【文献标识码】B 【文章编号】1001-5728 （2016 ）06-0638-02 doi: 10.13618/j.issn.1001-5728.2016.06.035 近年来，犯罪现场物证呈现多样化、微量化的 粘膜粘取法 使用长春博坤公司生产的脱落细胞 发展趋势。微量物证具有体积小、隐蔽性强、不易 粘取器，揭去红色标记保护膜，暴露出物证粘取膜片， 察觉、不易毁灭等特点 [1] 。目前微量物证DNA 检 对果核表面反复用力粘取，最后将物证粘取膜片置 验工作的瓶颈主要在接触性 DNA 检材的发现和提 于离心管内备检 [3] 。 取上，接触性 DNA 类生物检材因其 DNA 含量少、 为减少实验误差，每一物证要采用 3 种方法采 PCR 抑制物多、DNA 检验成功率低而成为法医 集，同时为保证 3 种方法的采集质量，每种方法对 DNA 检验的重点和难点 [2] 。本文结合实际工作中的 同一检材的提取部分都要保证具有唾液斑。 3 起案例，对果核上微量生物物证 DNA 的提取方法 2.2 DNA 的提取 进行了初步探讨，对基层实验室协助侦破案件有重 Chelex-100 法 在盛有检材的 1.5mL 离心管中， 要帮助作用。 加入 160µL Chelex-100，56 ℃孵化 30min，98 ℃煮 1 案例资料 沸 8min，震荡后 10 000rpm 离心 3min ，4 ℃保存备用。 案例1 2013 年 4 月 26 日，宁夏青铜峡市裕明 IQ 磁珠法 在预纯化的 1.5mL 离心管中，加入 街道办某室发生被盗，现场勘查发现地面上遗留未 200µL 裂解液和 3µL DTT，70 ℃、750rmp 恒温振荡 吃完的梨一个。 60min 。在新的 1.5mL 离心管中装过滤柱，将裂解 案例2 2013 年 12 月 4 日，宁夏吴忠市利通区 产物转移至过滤柱中，10 000rmp 离心 3min，收集 白寺滩村九队代某某家中被盗，北卧室床头柜下侧 滤液。使用美国 AB 公司生产的 AutoMate Exoress 地面上提取苹果核一个。 核酸纯化仪和 PrepFiler 法医 DNA 提取试剂盒进行 DNA 的提取和纯化。 案例3 2014 年 9 月 20 日，宁夏吴忠市利通区 金银滩镇团庄村九队马某某家被盗，现场提取厨房 2.3 DNA 的扩增与电泳 圆桌上未吃完的半根黄萝卜。