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右归饮联合骨髓基质干细胞两种介入法治疗早期股骨头坏死的对比实验研究
目 录
中文摘要 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„Ⅰ
ABSTRACT „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ Ⅲ
前 言 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 1
一、实验材料与方法 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
(一)实验材料 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
1.实验室 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
2.实验动物 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
3.实验试剂 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 2
4.实验器材 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 3
(二)实验方法 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4
1.实验分组 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4
2 .股骨头坏死模型的建立 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 4
3 .BMSCs 的分离、培养、增殖 „„„„„„„„„„„„„„„„„ 4
4 .经动脉灌注BMSCs „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 5
5. 股骨头局部移植BMSCs „„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 5
6 .右归饮制备及给药 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 5
7 .一般指标观察 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 6
8.标本收集 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 6
9 .影像学检测 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 6
10.组织病理学及免疫组织化学检测 „„„„„„„„„„„„„„„ 6
11.荧光定量RT-PCR 检测VEGF m 的RNA 表达 „„„„„„„„„„ 7
12.荧光定量RT-PCR 检测的TGF-β 的 mRNA 表达 „„„„„„„„ 10
13.统计学分析方法 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 11
二、结果 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 11
(一)一般情况观察 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 11
(二)细胞形态学观察 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 12
(三)股骨头大体观察 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 12
(四)影像学观察(MRI) „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 12
万方数据
(五)组织病理学及免疫组织化学检测 „„„„„„„„„„„„„ 13
(六)荧光定量RT-PCR 检测VEGF 的mRNA 表达 „„„„„„„„„ 18
(七)荧光定量RT-PCR 检测TGF-β 的mRNA 表达 „„„„„„„„„ 19
三、分析与讨论 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 21
(一)液氮冷冻法致毕格犬股骨头缺血性坏死动物模型 „„„„„„„ 21
(二)血管内皮生长因子(VEGF)在股骨头坏死修复中的作用 „„„„„ 21
(三)转化生长因子β (TGF-β)在股骨头坏死修复中的作用 „„„„„„ 22
(四)骨髓间充质干细胞治疗股骨头缺血性坏死 „„„„„„„„„„ 23
(五)介入治疗股骨头缺血性坏死 „„„„„„„„„„„„„„„„ 24
(六)右归饮对BMSCs 的分化诱导的影响 „„„„„„„„„„„„„ 25
(七)右归饮联合骨髓基质干细胞两种介入法的对比„„„„„„„„ 26
四、小结 „„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„ 27
结论 „„
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