生化反应干扰实验.ppt

临床生化干扰实验批准指南 (EP7-A);目 的;作 用;主要内容;术 语;术 语; 术 语;术 语;适用范围; 3. 适用以下干扰物质： 病理情况下的代谢物，如胆红素、脂肪、蛋白质、血红蛋白等 ； 病人治疗期间引入的物质，如药物、肠外营养、血浆代用品、抗凝剂等； 病人吸收的物质，如药品滥用、营养补充等； 标本准备引入的物质，如抗凝剂、防腐剂等； 标本处理过程中引入的污染物，如手霜、滑石粉、促凝剂等； 标本自身的基质效应，其理化性质跟理想的新鲜标本不同。 ; 1. 干扰对不准确度的影响 不准确度（总分析误差）包括不精密度、方法特异性偏倚和样本特异性偏倚（干扰），对干扰物质的敏感性可以引起系统误差和随机误差。 ;2. 分析前效应 分析前分析物或者它的浓度的改变通常称为“分析前效应”，这些作用可能会影响实验结果的临床应用，但不能视作“分析干扰”。这些作用： 体内药物作用 ， 如使用药物后因生理响应使激素浓度变化 标本处理， 由于蒸发、溶血或者血清长时间不分离使电解质、蛋白、水含量改变 标本收集， 如在静脉滴注时（内含分析物）取样 ;3.绝对干扰与相对干扰 干扰作用可看成是绝对的或相对的 绝对干扰：一般病人标本中含有某物质，一 旦它的存在即会引起干扰。 相对干扰：一般病人标本中含有某物质，其含量相对于混合样品中的平均浓度，不同病人样品中含有该物质的浓度变化引起干扰作用的变化，相对干扰作用在临床实验中更有意义。;基本概念;基本概念;基本概念;基本概念;基本概念;干扰实验的判断标准 ;1. 临床可接受标准 基于生理变异 源于临床经验 基于被分析物变异 ;2. 统计学意义 在确定一个物质是否存在干扰前，首先确定所得到的结果是否有统计学意义。 3.分析物检测浓度 干扰应该在两种医学决定浓度被评估，如果在一种浓度上进行测试，要注意有可能漏过在其他分析物浓度水平上有临床意义的干扰。 ;干扰实验的判断标准;干扰分析前的质量保证;干扰测定（Determination of interference characteristics);干扰筛选 ;实验设计;实验材料;实验材料;3. 对照样本 用制备贮存液相同体积的溶剂替代测试干扰物 ，其他要求与测试样本相同。 如果对照样本中存在测试物质（比如胆红素），使用合适的分析方法确定它的浓度。 如果对照样本中被分析物浓度与基础样本中明显 的不相符，考虑溶剂为潜在的干扰物。;重测次数要求;重测次数要求; z百分位值： ; z百分位值： 举例： 检测可接受干扰程度为1.5 mg/dL 的干 扰效应，95％（?＝0.05）检验水准时，重复性（批内精密度）为1.0mg/d L , 计算重复次数： ;批内标准差（d max/s）的倍数 ： 95％（?＝0.05）检验水准时检测不同的干扰 效应所需的重测次数如下： ;批内标准差（d max/s）的倍数 ： 举例 在1mg/dL 肌酐浓度水平，批内重复测定的标准差为0.075 mg/dL，实验室认为 0.1mg/dL是一个有意义的干扰。需要测定多少次，可能干扰能被检测到？ 首先，把不精确度表述为批内重复测定的标准差的倍数： 0.1mg/dL/0.075 mg/dL =1.33 。 将1.33向前舍入一位为1.3，上表决定重复测定次数，得出在95％（?＝0.05）检验水准时，每个对照和测试样品需要重复测定16次。;实验程序;6)用吸管吸取1/20容器体积的浓缩贮存液到 容量瓶中，称为测试样品， 7)用基础液补足到刻度体积，充分混匀； 8)用吸管吸取1/20容器体积的制备贮存液的 溶剂到第二个容量瓶，称为对照样品。 9)基础液补足体积，充分混匀； 10)准备能够被n整除的测试样本和对照样本，重复测定次数n由第三步确定；;11)按交互的顺序分析测试（T）和对照（C）样本； 如果检测系统受携带污染影响，增加额外的样本使对照样本免受来自测试样本携带污染的影响。 增加的额外对照样品Cx结果应舍弃。 12)记录结果，进行数据分析。 ;数据分析;3.计算95 ％ 置信区间的干扰效应 95 ％置信区间＝;结果解释;当解释干扰测试结果时考虑以下情况： 由于吸样错误，真实的干扰可能不同于观察到的“点估计”。如果无效假设成立，置信限100（1－?）％接受它；如果有效假设检验成立， 置信限100（1－?）％ 接受它。相反置信限分别为 100 ? ％ 和 100 ? ％ 。 如果被检物为非人血清成分检测，可