生长与繁殖的概念.ppt

个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈代谢，原生质与细胞组分的增加为个体生长。 群体生长——群体中个体数目的增加。可以用重量、体积、密度或浓度来衡量。（由于微生物的个体极小，所以常用群体生长来反映个体生长的状况） 纯培养(pure culture)——微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代,称纯培养. 计数方法： * * * * 生长与繁殖的概念 生长——微生物细胞吸收营养物质，进行新陈代谢，当同化作用异化作用时，生命个体的重量和体积不断增大的过程。 繁殖——生命个体生长到一定阶段，通过特定方式产生新的生命个体，即引起生命个体数量增加的生物学过程。 发育——从生长到繁殖，是生物的构造和机能从简单到复杂、从量变到质变的发展变化过程，这一过程称为发育。 第一节 微生物纯培养分离及测定生长繁殖的方法 个体生长?个体繁殖? 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖 一、获得纯培养的方法 ①液体稀释法 ②平板划线分离法（Streak Plate） ③倾注平板法（Pour Plate） ④平板涂布分离法（Spread Plate） ⑤选择性培养分离法 ⑥单细胞（单孢子）分离法 ⑦膜过滤（Membrane Filter） 首先将待分离的样品进行连续稀释,目的是得到高度稀释的效果,使一支试管中分配不到一个微生物.如果经过稀释后的大多数试管中没有微生物生长,那么有微生物生长的试管得到的培养物可能就是由一个微生物个体繁殖而来的纯培养物. 这种方法适合于细胞较大的微生物. ①液体稀释法 ②平板划线分离法（Streak Plate） An inoculating loop is used to thin out organisms on the surface of the agar. 特点：快速、方便。 分区划线（适用于浓度较大的样品） 连续划线（适用于浓度较小的样品） 连续划线 划线分离后平板上显示 的菌落照片 ③倾注平板法（Pour Plate） Organisms are serially diluted, then a small amount is added to an empty sterile petri dish, to which melted agar at 50 oC is added. Then mix to distribute the organisms. 1ml 1ml 9ml 1ml 9ml ④平板涂布分离法（Spread Plate） Liquid specimen is spread on the surface of solid agar with a sterile bent glass rod. 简单易行，但易造成机械损伤 ⑤选择性培养分离法 为了从混杂的微生物群体中分离出某种微生物，可以根据该微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等，采用选择培养的方法进行分离。 ＊利用选择培养基进行直接分离 ＊富集培养 ⑥单细胞（单孢子）分离法 采用显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养的方法。该方法要在显微镜下进行。 毛细管法：用毛细管提取微生物个体，适合于较大微生物。 显微操作仪：用显微针、钩、环等挑取单个细胞或孢子以获得纯培养。 小液滴法：将经过适当稀释后的样品制成小液滴，在显微镜下选取只含一个细胞的液滴来进行纯培养物的分离。 ⑦Membrane Filter When there is a small number of organisms in a large amount of liquid, the liquid is filtered through a mem- brane and then the membrane is placed on agarin a petri dish. 二、测定生长繁殖的方法 描述不同种类、不同生长状态的微生物生长情况，需选用不同的测定指标。 （一）微生物生长量和生理指标测定法 直接法 (测体积法，干重法) 间接法（比浊法，碳、氮含量法，其它生理指标） （二）微生物细胞数目的检测法 直接法（血球计数板法） 间接法（活菌计数法、液体稀释法、膜过滤法） 1.干重法 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。一般干重为湿重的10-20%，而一个细菌细胞一般重约10-12-10-13g。 该法适合菌浓度较高的样品。 2.比浊法 原理是在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比，即与光密度成正比，菌数越多，光密度越大。