(损坏性关节炎)（YKL-40）-中国试剂网.PDF

中国试剂网 3.15.3.51 人CD 蛋白(损坏性关节炎) （YKL-40 ）酶联免疫分析（ELISA ） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中CD 蛋白(损坏性关节 炎) （YKL-40 ）含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人CD 蛋白(损坏性关节炎) （YKL-40 ）水 平。用纯化的人CD 蛋白(损坏性关节炎) （YKL-40 ）抗体包被微孔板，制成固相 抗体，往包被单抗的微孔中依次加入YKL-40 ，再与HRP 标记的羊抗鼠抗体结合， 形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅 和样品中的YKL-40 呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值）， 通过标准曲线计算样品中人CD 蛋白(损坏性关节炎) （YKL-40 ）浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成 48 孔配置 96 孔配置 保存 说明书 1 份 1 份 封板膜 2 片（48 ） 2 片（96 ） 密封袋 1 个 1 个 酶标包被板 1 ×48 1 ×96 2-8℃保存 标准品：360pg/ml 0.5ml ×1 瓶 0.5ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 标准品稀释液 1.5ml ×1 瓶 1.5ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 酶标试剂 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 样品稀释液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 显色剂A 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 显色剂B 液 3 ml ×1 瓶 6 ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 终止液 3ml ×1 瓶 6ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 20 倍浓缩洗涤液 20ml ×1 瓶 30ml ×1 瓶 2-8 ℃保存 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。 中国试剂网 3.15.3.51 仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 10-20 分 钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉 淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清， 保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20 分钟左右 （2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS （PH7.2-7.4 ） 稀释细胞悬液，细胞浓度达到 100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并