FACSCalibur流式细胞仪中文操作手册.PDF

FACSCalibur 流式細胞儀中文操作手冊 FACS101 Handbook Pro 本課程介紹「表面抗原流式分析」有關之基礎工作原理。 一、FACS Calibur 基本結構 1.1 儀器本體： 1. 儀器外觀： 電源開關在FACSCalibur儀器右側下方，先啟動儀器本體，再打開電腦。 2. 光學系統：FACS Calibur 基本配有一支波長488 nm 的氬離子雷射 以FACS Calibur 基本型為例  FSC Diode 只收488 nm正向波長散射光  SSC PMT 只收488 nm側向波長散射光  FL1 PMT 螢光光譜峰值落在綠色範圍（波長515-545 nm ）  FL2 PMT 螢光光譜峰值落在橙紅色範圍（波長564-606 nm ）  FL3 PMT 螢光光譜峰值落在深紅色範圍（波長650 nm ） FACS101 Handbook Pro - 1 – 3. 儀器面板： 儀器前方面板的右下方有三個流速控制鍵、及三個功能控制鍵。 流速控制 ： LO ：樣品流速：12 l /min MED ：樣品流速：35 l /min HI ： 樣品流速：60 l /min 功能控制 ： RUN ：此時上樣管加壓，使細胞懸液從進樣針進入流動室。（正常顯示綠 色；橘色時表示儀器不正常，請檢查是否失壓。） STANDBY ：無樣品或暖機時之正常位置，此時鞘液停止流動，雷射功率自動 降低。 PRIME ：去除流動室中的氣泡，流動室施以反向壓力，將液流從流動室沖入 樣品管，持續一定時間後，以鞘液 回注滿流動室。PRIME 結 束，儀器恢復STANDBY 狀態。 4. 儲液箱抽屜： 在主機左下方之儲液箱抽屜。可向前拉開 ，內含鞘流液桶 、廢液桶 、鞘液過濾 器Sheath Filter ，及空氣濾網Air filter 。請注意氣路減壓閥VENT TOGGLE之位 置。 FACS101 Handbook Pro - 2 – 鞘液桶 ：位於抽屜左側，容積4 升。裝滿鞘液桶 ，儀器可以運行大約3 小時。 筒上裝有液面感應器，鞘液用完時，儀器軟體上會有顯示。鞘液筒蓋上 有金屬環扣，保証鞘液筒密閉。 廢液桶 ：位於抽屜右側，容積4 升。桶上裝有液面感應器，鞘液用完時，儀器 軟體上會有顯示。注意廢液可能有潛在的生物傳染性。 鞘液過濾器：0.22um 過濾器，去除鞘液中的雜質，保証進入流動室的鞘液是乾 淨的。 氣路減壓閥：沿箭頭方向移動閥門開關，鞘液筒減壓，氣壓恢復正常。在鞘液 桶裝填鞘液時，需要減壓。 空氣過濾網：用於過濾冷卻雷射的空氣。 5. 上樣區： 上樣區是樣本管的上樣位置。它包括三個部 分，一個是進樣針Sample Injection Tube ，將 樣本輸入流動室，還有就是支撐架Tube Support Arm 、和液滴存留系統Droplet Containment System 。 進樣針：是一根不鏽鋼管，將細胞從樣本針中吸入流動室。進樣管外有一套管，