中期考核汇报演讲稿.docx

各位老师同学们，大家好！我是职业卫生专业研究生林天骥，我的导师是邹飞教授。接下来，我主要从以下三个方面进行我今天的中期汇报：思想政治，课程成绩，科研进展。。。。1.接下来，我将对我的课题进展进行简单的总结，汇报。我所研究的课题是：钙池操控性钙离子内流在人肺癌细胞中的作用。我将主要从课题背景、技术路线、实验材料及相关实验方法、实验进展及下一步的实验计划5个方面进行汇报。2.首先介绍一下我的研究课题的背景：肺癌是全世界最常见诊断的恶性肿瘤，也是死亡率最高的肿瘤之一。临床上发现的肺癌病人大多数已经处于中晚期，以目前的治疗手段，病人的五年总生存率只有约15%左右。肿瘤细胞体内恶性增殖、侵袭和转移是导致其高死亡率的主要原因。肺癌中80％是非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）,病理上以鳞癌、腺癌和大细胞癌为主，非小细胞肺癌的增殖、侵袭、转移是一个复杂的，多因素调控的，多个相关蛋白相互作用的动态过程，。因此研究非小细胞肺癌的发生发展机制，在肺癌中寻找有效的治疗靶点，对于改善NSCLC预后，实施有效的个体化治疗尤为重要。那么再简单的介绍一下我们课题中的SOCE是怎样的一种机制，钙离子作为第二信使，在细胞信号转导通路中起着重要的作用，调控细胞周期、分化、增殖和凋亡。近年来关于钙库操控性钙通道（SOCC）研究的日益增多，由SOCC介导的钙库操纵性钙内流（SOCE）是非兴奋细胞钙内流的主要方式。研究发现SOCE信号通路中的STIM1及ORAI1蛋白，由于其在介导SOCE中的重要作用而受到广泛关注。STIM1主要存在于细胞内质网膜上，在钙池消耗后，它作为一种“钙池信号感受蛋白”感受钙池充盈状态，并向细胞膜移动靠近，此后STIM1通过羧基端与细胞膜上的SOCC通道蛋白如ORAI1相互作用而开放钙通道，从而激活形成SOCE，使细胞外钙内流。而文献报道称在肿瘤细胞的增殖、迁移等影响到癌症发生发展的相关生物学行为中钙池操控性钙离子内流SOCE发挥着重要的的作用。迁移是多细胞生物为了防止病原体入侵、促进自身发育、修复受损组织而具备的一种重要的功能，恶性的肿瘤细胞所具备的固有的迁徙能力使它们侵袭新的组织最终达到迁移的目的。为了入侵其他组织，肿瘤细胞需要提升自身的迁移能力，同时诱导细胞外基质的蛋白质水解。SOCE在肿瘤细胞中通过介导细胞骨架和黏着斑的重组在肿瘤细胞的迁移中发挥着重要的作用。同时也有研究表明SOCE在肿瘤细胞的增殖中起作用，报道称在人的黑色素肿瘤组织和细胞中STIM1和Orai1蛋白高表达引起了SOCE导致了黑色素肿瘤组织和细胞增殖功能的改变。以下分别是2015、2016年发表的关于分析总结STIM1\ORAI1介导的SOCE在癌症的发生发展中的作用的两篇综述，可见目前对癌症的增殖和转移的相关研究有很多，但是通过文献查阅分析，我们发现目前还没有关于STIM1/ORAI1在肺癌的增殖和转移中的作用的相关研究，并且其作用机理仍然不明确。那么STIM1/ORAI1介导的SOCE对肺癌细胞的增殖、迁移的功能的影响到底是怎样的。改变STIM1\ORAI1在肺癌细胞中的表达，肺癌细胞的这些生物学行为又会发生怎样的改变？SOCE又是在其中发挥着怎样的作用？这其中的分子机制是怎样的？对于这些疑问，我们课题组进行了相关的研究。那么以下是我的课题开展所采用的实验材料和方法以及技术路线图，我们的实验材料及方法有：……技术路线：我们将分别采用shRNA和质粒在非小细胞肺癌细胞中改变STIM1和ORAI1的表达，观察肺癌细胞增殖和迁移的改变，这种改变是否是因为SOCE的激活或抑制而导致的，我们将采用confocal的技术检测STIM1\ORAI1表达变化后，肺癌细胞内的钙信号的变化来验证这种推测。那么为什么目前还没有SOCE在肺癌细胞增殖迁移中的作用的相关研究呢？这其中的作用机制是否有别于其他这种SOCE的作用已经被证实的癌症？我们将对其中的分子机制进行进一步探究，建立SOCE与肺癌细胞的增殖和迁移之间的信号通路上的联系。最后我们将进行体内的裸鼠成瘤实验，来进一步确实STIM1\ORAI1介导的SOCE对非小细胞肺癌的增殖和迁移的做用.以下是实验结果汇报的内容结果一：为了探究SOCE是否影响肺癌细胞的增殖和迁移，并且排除药物的非特异性作用，我们针对钙库操控中的核心分子STIM1进行干扰。在肺癌细胞H1299中使用了2个不同位置的干扰序列，干扰12h STIM1的表达就有所下降，48h后均达到较好的效果，显著抑制STIM1蛋白丰度。结果二：那么当STIM1在肺癌细胞中的表达下降后，细胞的增殖是否受到了影响呢。我们在采用两个序列干扰STIM1表达48h时间后，采用MTT检测细胞活力的方法，发现干扰组H1299细胞的增殖与阴性对照组相比受