选修③专题一基因工程第1、2节基因工程的基本工具和基本操作程序.DOC

选 修 ③ 专题一 基因工程 第1、2节 基因工程的基本工具和基本操作程序 如何判断同一种限制酶切割形成的末端 例1 下列是四种限制酶切割形成的8个末端，你是否能用DNA连接酶将它们连接起来？ （1）…CTGCA （2）…AC （3）GC… …G …TG CG… （4）…G （5）G… （6）…GC …CTTAA ACGTC… …CG （7）GT… （8）AATTC… CA… G… 答案 （2）和（7）能连接形成…ACGT… …TGCA… （4）和（8）能连接形成…GAATTC… …CTTAAG… （3）和（6）能连接形成…GCGC… …CGCG… （1）和（5）能连接形成…CTGCAG… …GACGTC… 基因工程的综合考查 例2 （2007年天津理综，30）在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kanr）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。 请据图回答： （1）A过程需要的酶有 。 （2）B过程及其结果体现了质粒作为载体必须具备的两个条件是 。 （3）C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入 。 （4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，D过程应该用 作为探针。 （5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。 ①将转基因植株与 杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。 ②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为 。 ③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占 %。 答案 （1）限制性内切酶和DNA连接酶 （2）具有标记基因；能在宿主细胞中复制并稳定保存 （3）卡那霉素 （4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因 （5）①非转基因植株 ②3∶1 ③100 1.下图为DNA分子的切割和连接过程，据图回答下列问题： （1）EcoRI是一种 酶，其识别序列是 ，切割位点是 与 之间的 键。切割后产生的DNA片段末端形式为 。 （2）不同来源的DNA片段结合，在这里需要的酶应是 连接酶，此酶的作用是在 与 之间形成 键，而起“缝合”作用的，还有一种连接平末端的连接酶是 。 答案 （1）限制性核酸内切 GAATTC 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌呤脱氧核苷酸 磷酸二酯 黏性末端 （2）E ·coliDNA 鸟嘌呤脱氧核苷酸 腺嘌呤脱氧核苷酸 磷酸二酯 T4DNA连接酶 2.材料 苏云金芽孢杆菌生长到一定阶段，菌体内一端形成芽孢，另一端形成一种被称为伴孢晶体的蛋白质晶体。菌体破裂后释放出芽孢和伴孢晶体，伴孢晶体本身并无毒性，是毒素的前体。当昆虫吞食伴孢晶体后，在肠道内碱性环境条件和特定的蛋白酶的作用下，伴孢晶体变成毒素分子，能使小肠上皮细胞萎缩退化，昆虫停食，最后脱水死亡。科学家利用苏云金芽孢杆菌的这个特性，在实验室大量培养，制成生物农药，洒在农作物上，让害虫吃后中毒死亡。或利用基因工程技术，把苏云金芽孢杆菌的抗虫基因转到农作物体内，培育出抗虫品种。 请根据上述材料回答下列问题： （1）上图中，切断a处的工具酶是 ，切断b处的酶是 。 （2）作为目的基因载体的细菌质粒往往要带有一个抗生素抗性基因，该抗性基因在基因工程中主要用于 。 （3）苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞是否表达，其检测方法是