Blue Beads 6FF 1124 - 抗体纯化,内毒素去除,蛋白纯化填料,抗体纯化.PDF

Blue Beads 6FF 目录 1. 产品介绍………………………………………………………………….……..1 2. 纯化流程………………………………………………………………………...1 3. 填料清洗………………………………………………………………………...2 4. 订购信息及相关产品…………………………………………………………3 1.产品介绍 Blue Beads 6FF 是一种用于纯化白蛋白、干扰素、需要核苷酸辅助的酶、ɑ2-巨球蛋白凝 血因子等的亲和层析介质。Blue Beads 6FF 以高交联的6%琼脂糖为介质，可耐受较高的 流速及更高的化学稳定性 ，适合大规模纯化。具体性能见表1。 表1. Blue Beads 6FF 品性能 性能 指标 基质 高度交联的6%琼脂糖微球 配体 活性蓝3G 配体密度 约7µmol/ml 介质 载量 18mg 人血清白蛋白/ml 介质 粒径 (μm) 45-165 最大流速 0.3 MPa, 3 bar pH 稳定范围 4-12 储存缓冲液 20% 乙醇 ，0.1M KH PO ,pH8.0 2 4 储存温度 2°C - 8°C 2.纯化流程 2.1 Buffer 的准备 所用水和 Buffer 在使用之前建议用0.22μm 或0.45μm 滤膜过滤。 以人血清白蛋白 （HAS ）的纯化为例 结合/洗杂 Buffer: 50mM Na HPO ，50mM 柠檬酸钠 ，pH7.0 2 4 洗脱 Buffer: 50mM Na HPO 50mM 柠檬酸钠 ，1-2M NaCl ，pH7.0 2 4 ， 注：结合液和洗脱液可根据样品性质进行适当改变 ，原则是低盐上样高盐洗脱。 2.2 样品准备 样品在上样前建议离心或用0.22μm 或0.45μm 滤膜过滤 ，减少杂质，提高蛋白纯化效率 和防止堵塞柱子。 2.3 Blue Beads 6FF 装填 Blue Beads 6FF 被广泛应用于工业纯化 ，因此 ，涉及到各种中压色谱层析柱的填装 ，下面 介绍使用Blue Beads 6FF 填装层析柱的方法。 1 / 3 州天地人和生物科技有限公 司 层析柱的装填 （使用储液器装填） 1. 用去离子水冲洗层析柱底筛板与接头 ，确保柱底筛板上无气泡 ，关闭柱底出口，并在柱 底部留 1-2cm 的去离子水。 2. 将树脂悬浮起来 ，小心的将浆液连续地倒入层析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入浆液可减 少气泡的 生。 3. 如果使用储液器 ，应立即在层析柱和储液器中加满水 ，将进样分配器放置于浆液表面 ， 连接至泵上 ，避免在分配器或进样管中 生气泡。 4. 打开层析柱底部出口，开起泵 ，使其在设定的流速下进行。最初应让缓冲液缓慢流过层 析柱 ，然后缓慢增加至最终流速，这样可避免液压对所形成柱床的冲击 ，也可以避免柱床形 成的不均匀。如果达不到推荐的压力或流速 ，可以用你所使用泵的最大流速，这样也可以得 到一个很好的装填效果。（注意：在随后的色谱程序中，不要超过最大装柱流速的75% ）当 柱床高度稳定后 ，在最后的装柱流速下至少再上3 倍柱床体积的去离子水。标上柱床高度。 5. 关闭泵 ，关闭层析柱出口。 6. 如果使用储液器 ，去除储液器 ，将分配器至于层析柱中。 7. 将分配器推向柱子至标记的柱床高度处。允许装柱液进入分配器 ，锁紧分配器接头。 8. 将装填好的层析柱连接至泵或色谱系统中，开始平衡。如果需要可以重新调整分配器。 2.4 样品纯化 1. 将Blue Beads 6FF 装入合适的层析柱 ，层析用5 倍柱体积的