细胞培养用品的准备.PPTVIP

细胞培养用品的准备 主讲教师：郭建东 一、培养用品的清洗 1、玻璃器皿 干净透明、无油迹、无残留毒物 浸泡：水刷、5%稀盐酸过夜，用后立即浸泡 刷洗：刷子质量、用力 清洁液浸泡：浓硫酸、重铬酸钾、蒸馏水配成 冲洗：注2/3水、＞10次、2-3次蒸馏水、烤干 清洗液配方 2、玻璃滤器：一周时间 3、胶塞、盖子等杂物：及时 4、塑料器皿：洗干净、晾干、2%NaOH过夜、冲洗、5%盐酸浸泡30分钟、流水冲、蒸馏水 二、包装 1．局部包装 较大瓶皿如细胞培养瓶、烧杯、容量瓶、三角瓶、消毒筒以及体积较小，但瓶口包装方便的容器如青霉素瓶等的包装，通常采用局部包装。 2．全包装 体积较小的培养瓶皿、注射器、胶塞及不便局部包装的用具如金属器械等，需采用全包装，现多采用直接装入铝饭盒的方法。用铝饭盒来封装小培养瓶，胶帽和胶塞等很好，但往往因盖不严紧使用期限不宜太长。因铝饭盒不透明，在盖上宜写上用品名称以便于确认，吸管在装入消毒筒之前，先用少许脱脂棉将吸管接口端堵塞，松紧度适宜，过松易脱落，过紧不透气，妨碍使用；然后装入消毒筒中，消毒筒底部应垫以软纸或棉花以防吸管装入时折断管尖；最后再包装入筒中封口。 3、包装材料 皱纹包装纸、硫酸纸、牛皮纸、棉布等 三、消毒灭菌 1、消毒灭菌的方法 干热消毒：烤箱、玻璃器皿 湿热消毒：高压蒸汽灭菌（121℃-15至20min）） 紫外线消毒：不能高于2.5m 过滤除菌消毒：Zeiss滤器、玻璃、微孔滤膜 消毒剂及抗菌素： 电离辐射消毒： 2、消毒方法的选择 实验室环境：过滤、紫外、来苏儿、酒精擦桌椅 培养器械：干热或湿热 培养用液：高压蒸汽、过滤除菌 * * 200ml 1000ml 1000ml 蒸馏水或去离子水 1000ml 200ml 100ml 浓硫酸 63g 120g 100g 重铬酸钾 强液 次强液 弱液 清洁液浓度 名称