(ED50) LAL assay细菌内毒素检测细胞存活与毒性试验.PDF

細胞毒性與藥物開發 實驗分析專刊 細胞存活 (viability) 與毒性 (cytotoxicity) 的檢測在藥物開發上是必要的過程，為動物 實驗模式與臨床試驗前的重要評估依據。 細胞存活 (viability) 與毒性 (cytotoxicity) 的檢測在藥物開發上是必要的過程， 為動物實驗模式與臨床試驗前的重要評估依據。 傳統實驗方法採用tetrazolium salts物質 (MTS,MTT, XTT) 去測量粒線體內NADH 的代謝活性，但由於只能使用吸收光偵測，因此受背景值干擾與敏感度等問題影響 而備受質疑。近幾年來，AlamarBlue 克服了上述問題，且無細胞毒性，非常適合 進行藥物對細胞毒性的動力學分析(Time course Dose dependent) AlarmarBlue 原理與特性 細胞內粒線體的酵素 (NADH) 將原本深藍色、無螢光性的Alamar Blue 還原成為粉紅色、 高螢光性的產物，以Thermo的微孔盤分析儀進行吸收光OD570 波長或螢光模式 (Ex/Em=530-560 nm/590 nm)進行數據判讀 AlarmarBlue 特性 1. 可以螢光偵測，提高靈敏度(只需50顆細胞) 2. 無細胞毒性，不會形成formazan結晶，可連續觀察不同時間點的生長曲線 3. 適用貼附型/懸浮型細胞、細菌、真菌等樣品 4. 操作流程簡易，只需2步驟即完成偵測 Product Code Pack size Usage BUF012A 25ml Enough for 2,500 wells/96-well plate BUF012B 100ml Enough for 10,000 wells/96-well plate 3916 100個/箱 (含4包，20個/包) 96 Well Microplates (全黑盤) 3603 48個/箱(單一無菌包裝) 96 Well Microplates (黑盤透明底) w w w . l e v e l . c o m . t w 1 What is ED 50 ? ED 50=Effective dose 50% ，為藥物半數有效劑量，指藥物能引起50％試驗個體 呈陽性藥效反應(質反應)的劑量。 應用範圍 藥物有效劑量(ED)可判斷藥物效能，更為治療指數(therapeutic index，TI)之重要依據，其計算 方式有回歸法、概率單位法(Bliss法) 及寇氏法(面積法)。以往研究人員只能將繁瑣的數據分析， 轉移到統計分析軟體或是Excel，耗費人工與時間，但必威体育精装版的Thermo Varioskan LUX提供SkanIt 專業分析軟體，只要一鍵即可完成讀盤與ED 50分析 。 SkanIt 軟體 更具有新藥開發專用版本(Drug discovery edition) ， 符合美國食品暨藥物管理局 規範(CFR 21 Part 11)，保障電子記錄的真實性。使電子記錄更具可信力，無法竄改、造假或輕 易複製。 2 提供完整R 分析公式 實驗設計 需要同時分析三種不同Compound的ED 50， SkanIt 軟體只要一個按鍵就可得到數據、