兔抗人外周血单核细胞、兔抗猴脾脏淋巴细胞免疫血清的制备及其在.pdf

动 物 学 研 究 ， （）： !# $% ’ !( ) *+ , -. /0 -. , )*1 2 3440 !-* , -+-. 5667689:;7 %=%;:? 兔抗人外周血单核细胞、兔抗猴脾脏淋巴 细胞免疫血清的制备及其在分离人和 猕猴胚胎内细胞团中的应用 ， ， ， ， ! ! ! ! ! ! 张秀珍 ，采克俊 ，王淑芬 ，胡智兴 ，裴轶劲 ，季维智 （ 中国科学院昆明动物研究所，云南 昆明 ； 中国科学院研究生院，北京 ） !’ #$% ’ !%%%’ ： 摘要 采用梯度离心的方法用淋巴细胞分离液从浓缩的人白细胞悬液中分离人外周血单核细胞，从猕猴新 鲜脾脏中研磨分离猕猴脾脏淋巴细胞；分别将人外周血单核细胞和猕猴脾脏淋巴细胞作为免疫原，每次通过耳 缘静脉注射 * 个细胞免疫日本大耳白兔，每周免疫一次，共免疫 次，制备兔抗人外周血单核细胞和兔抗 ( ) !% 猕猴脾脏淋巴细胞免疫血清。体外培养人和猕猴胚胎至囊胚，采用制备的免疫血清，分离人和猕猴囊胚内细胞 团，用于建立人和猕猴胚胎干细胞系。结果如下：（）用半微量细胞毒实验法测得兔抗人外周血单核细胞免疫 ! 血清和兔抗猕猴脾脏淋巴细胞免疫血清的效价分别为 和 ；（）两种免疫血清成功地裂解了 个人 !+ % !+ #(% !$ 囊胚和 个猕猴囊胚的滋养层细胞，分离出了内细胞团，表明免疫血清的制备取得了成功，为建立人和猕猴 胚胎干细胞系奠定了基础。 ： 关键词 免疫外科手术法；免疫血清；分离内细胞团；人囊胚；猕猴囊胚；胚胎干细胞 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） ,(’ - %$( . $*$ %%# %! . %%(* . %# @%A;;B96C 6D ;9B ECB9FGHI;C @JK/ ECB9=%HI ;CL ;9B ECB9F?%=H= K6CM%N O !## $%’’ P 4A7%%C /%77 ECB9=%HI ;CL Q?%9 EAA79:;B96C 9C 3=67;B9C8 GHI;C ;CL K6CM%N 3CC% /%77 K;==%= !. ! !.