无桔霉素高比例开环式莫纳可林K红曲产品的生产.pdfVIP

维普资讯 星 塑 鱼 无桔霉素高比例开环式莫纳可林K红曲产品的生产 许赣荣 陈 晔 陈 蕴 林小荣 李 馨 (江南大学教育部工业生物技术重点实验室 生·物工程学院，无锡，214036) 摘 要 筛选得到1株不产桔霉素，高产开环式莫纳可林K的红曲霉9901菌，该菌固态发酵红曲 米中莫纳可林K的含量最高可达 ll000mg g。红曲产品中开环式莫纳可林K的比例为7O％～ 9O％。该菌在酵母提取物和蔗糖培养基及谷氨酸钠及葡萄糖为主的培养基的培养液中均未测出 桔霉素。液态及固态发酵红曲产品也未测出桔霉素，初步表明该菌株没有桔霉素生物合成能力。 固态发酵过程中，宜采取先3O℃后26℃的变温控制模式；物料初始水分含量宜控制在65％左右。 关键词 红曲霉，固态发酵．莫纳可林K，桔霉素 含莫纳可林 K(MK)的功能性红曲产品， 摇瓶发酵培养基 (gL／)：甘油 100；大豆水 既可作为药品，也可作为功能性食品，安全、无 解液25(干物质)；NaNO32；MgSO4·7H2O1； 毒副作用方面的要求应当比普通色素红曲产品 K2HPO4。3H2O1；ZnSO4·7H2O2；玉米浆 10； 的要高。红曲中的桔霉素事关食品安全u．2J， pH4．5。摇瓶培养条件：行程 10cm、70r／min 根据世界一些发达国家对食品和药品中桔霉素 往复振荡发酵2～3周。发酵结束后，取出菌丝 含量严加控制的事实，也基于我国功能性红曲 体及发酵液，搅碎后，用FTSEZ585Q真空冷冻 产品的现状，笔者开展了本课题的研究，目的是 干燥机制成冻干粉。 生产无桔霉素，高比例开环结构莫纳可林 K的 固态发酵：1000mL瓶装原料米 100g(水 功能性红曲产品。 分含量12％)，初始加水量90mL，灭菌后，接人 液态种子 50mL。三角瓶培养。30～25℃。发 1 材料与责法 酵2～5周。红曲米经 100℃灭菌30min。后置 1．1 红曲霉培养及发酵 于烘箱中50℃烘24h。粉碎。 实验中所用的多株红曲霉菌种为本实验室 1．2 莫纳可林K的测定 收集并保藏的红曲霉。根据红曲霉9901在数 闭环式莫纳可林K(洛伐他汀)纯品由海正 种培养基的形态特征及胞子形态的观察，初步 药业提供。 判定其为紫色红曲霉(Monascuspurpureus)。 1．2．1 MK标准样品的处理方法 种子斜面培养基：土豆培养基。 MK的闭环式标样和开环式标样分别配 摇瓶种子培养基：葡萄糖 60g；蛋白胨 25 制，其闭环式标准样品直接溶解于甲醇或乙腈。 g；NaNO32g；MgSO4。7H2O 1g；KH2PO41g； 开环式标准溶液在RomanKysiika的方法HJ的 pH5．0。500mL三角瓶装液 100mL。 基础上，加以改进，在碱性条件下水解闭环式洛 YES培养基(g／L)：酵母浸膏20；蔗糖60。 伐它汀，使之转化为开环式结构。经验证，闭环 30℃静止培养2周。 洛伐它汀全部转化为开环式洛伐它汀。 MSG培养基(gL／)：葡萄糖50；谷氨酸钠 1．2．2 固态发酵样品的萃取 6；KzHPO45；KH2PO45；MnSO4。H2O 0．03； 固态发酵的红曲米研磨成粉状(过80目)， FeSO4。7H2O 0．01；MgSO4。7H2O 0．5；CaCI2 称取0．5g样品，加入25mL67％乙醇，50℃水 0．1；ZnSO4·7H2O0．05。30℃摇瓶培养 1周。 浴 1h，中间间歇振荡3～4次，最终定容到25 第一作者：博士，教授。 收稿时间：2004—03—01