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INC-4基因表达对乳腺癌细胞生长抑制作用的研究.pdf

肿瘤2008年4月第28卷第4期 Tumor Vo1.28,No.4,April,2008 ·30l· DOI:10.3781/j.issn.1000—7431.2008.04.007 Basic Research·基础研究 ING4基因表达对乳腺癌细胞生长抑制作用的研究 曹 芳,魏钦俊,鲁雅洁,潘 梅,曹 新 (南京医科大学生物技术系,南京 210029) [摘要] 目的:研究人ING4基因对乳腺癌细胞MCF-7的生长抑制作用。方法:通过实时荧光定量一PCR(rea1.time fluorogen— tic quantitative·PCR,RFQ—PCR)检测3种乳腺癌细胞株中ING4 mRNA的表达水平;INC.4基因的表达质粒转染MCF-7细胞; M rr法和FCM法检测 G4基因对MCF-7细胞增殖的影响;Annexin—V/PI双染法观察细胞凋亡情况;RT.PCR法分析转染 G4后p53、p21及bax基因的转录表达情况。结果:在3种乳腺癌细胞MCF一7、MDA—MB-435和MDA.MB一231中ING4的表 达均明显低于正常乳腺组织。转染 G4表达载体的MCF·7细胞较对照组细胞生长速度减慢(P0.05);细胞周期中G.期比 例增加,s期比例减少;细胞凋亡率升高。p53的表达未见明显变化,而p21和bax表达显著上调。结论:,『vG4与乳腺癌的发 生发展具有一定相关性;高表达 G4基因能够抑制人乳腺癌细胞MCF-7的生长。 [关键词] 乳腺肿瘤;转染:基因,肿瘤抑制;细胞凋亡 [中图分类号] R737.9 [文献标志码] A [文章编号] 1000-7431(2008)04-0301-04 The inhibitory effects of exogenous ING4 gene expression on the growth of breast cancer cells CAO Fang,WEI Qin—jun,LU Ya—jie,PAN Mei,CAO Xin (Department of Biotechnology,Nanjing Medical University,Nanjing 210029,China) [ABSTRACT] Objective:To observe the inhibitory effects of INC.4 gene expression on the growth of MCF-7 cells.Methods:ING4 mRNA expression in three breast cancer lines was detected by real—time fluorogentic quantitative—PCR(RFQ—PCR).pcDNA3.1(+) ,『vG4 was transfected into MCF-7 cells.The proliferation activity of MCF-7 cells was measured by Mrrr assay and flow cytometry.Cell apoptotic ratios were analyzed by Annexin—V/PI double staining.Results:The expression of ING4 was markedly lower in MCF-7.MDA— MB-435,and MDA·MB一23 1 cells compared with normal breast tissues.Over expression of ING4 slowed down proliferation speed of MCF-7 cells,increased the cell proportion in Gl phase and decreased the proportion in S phase(P0.05).The apoptotic ratio of MCF-7 cells was significantly increased compared to control group(P0.05).RT—PCR revealed that expressions of p2 1 and bax gene were all up·regulated but p53 had no change.Conclusion:lNG4 was associated with tum

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