人参DNA导入水稻引起变异研究.pdfVIP

试验研究2008．11 墓iIjj地 人参DNA导入水稻引起变异研究 铙水佳 刘云发 铙华锋 陈祖武 (1．湖北省武穴市农作物 良种研究所 435413；2．湖南省农笠院落生物技术研究所 长沙4l0l25) 摘要：采用花粉管通道技将人参 DNA导入水稻 “补血黑糯 ”获得D2代变异植株，利用 12条染色体 上的400多对 SSR 引物对供体 、受体及变异后代进行 了DNA检测，证实其 中代材料 出现补血黑糯 不具有的带型．表明人参基因已经导入补血黑糯中。 关键词：人参；DNA；花粉管通道技术；补血黑糯 ；变异 近几年 ，我们运用周光宇设计建立 的利用花粉管 培，D 代导人人参 DNA的补血黑糯与对照(原补血黑 通道技术1【】，以水稻属外多种植物DNA为供体 ，开展 糯)外观无任何明显变异，混收种子 0．8kg。 了水稻高产特种功能稻米的分子育种研究。先后用芭 2 导入人参 DNA后的补血黑糯 D 代变异 茅草、芦竹等外源DNA导入水稻后，获得比受体显著 2007年将从海南陵水县冬繁导人人参 DNA补 超亲的优良变异后代 。由此证实，外源 DNA导入水稻 血黑糯的D代收种子种植0．5亩约6000株，其中出 确实能产生遗传变异而育成新品种。本试验以水稻 现分离单株约 1％左右 ，但大多数表现比受体农艺性 “补血黑糯 ”作为受体植物，导人人参 DNA进行育种 状变差，株秆变高，稻穗变小等负超亲现象，其中有两 研究．旨后培出具有保健功能的高产水稻品种。 株具有明显超亲优势，一株熟期变早，比受体早 5d，植 1 试验材料和外源 DNA导入方法 株变矮 10cm左右，每穗实粒数多5O粒左右，有效穗 1．1 试验材料 13根也多于受体平均数的5穗 。此株已采收，当年又 供体 ：人参 ，由吉林省集安市山宝人参鹿耳经销 送海南加代研究。另一株的株高及株叶形态无变化， 行提供。 但穗粒数明显多于受体，千粒重也显著增加，生育期 受体 ：水稻品种补血黑糯 ，为本所育成的特种黑 约长于受体 5d左右 。此株也 已采收，进行后续研究。 色糯稻品种。 3 DNA分子检测 1．2 外源 DNA导入方法 将导人人参的外源 DNA补血黑糯 D：代变异株 DNA提取 ：采用 CTAB方法从活体人参 叶片提 叶片采用 CTAB方法提取DNA，用分布于 12条染色 取 出的DNA经紫外分光度计和琼脂糖电泳检查 ，质 体上的400多对SSR引物对供体、受体和变异材料 量符合分子育种的要求。 进行了检测分析 。后代材料在染色体 1一RM488位 外源 DNA导入 ：2006年 8月 中旬 ，在导人 DNA 点、染色体 4一RM335位点、染色体 5-RM334位点、 前一天下午，选择长势好、已有少量开花的稻穗 ，除 染色体 6-RM469位点、染色体 8-RM337位点、染色 去 已经开花的穗粒 ．次 日上午 11时至下午 1时前 体 9一RM410位点上均有 明显差异 ，表明人参基因已 (即 白花授粉 1～2小时)选择 已授粉后 的穗粒 ，斜 向 经导入水稻补血黑糯中。 剪去穗粒 1／2至2／3以达到剪去柱头为限，并及时在 4 讨论与展望 剪 口处滴加人参DNA溶液 (浓度为0．Sm~m1)，其 现代科学告诉我们，地球上所有生物的DNA遗 余未开花的穗粒全部剪去 ，然后套上纸袋并在纸袋 传密码均是通用的。因此，从理论上讲，外源DNA导 上写明供体和受体名称及导入外源 DNA 日期 。25— 入可 以将不同种属 、甚至不同物种的NDA导人任何 30d后收获种子，装人纸袋晒干后保存备用 。 受体的细胞 中打破物种间的界限．拓宽了基因重组 田间栽培管理 ：2006年秋送海南省陵水县冬繁， 范围[3J，改变了受体基因遗传结构和受体遗传特性， 将共收获 14粒种子按一般水稻种植方法育苗和栽 甚至有