兔病毒性出血症的诊治.pdfVIP

— 。 43—— 中国动物检疫 2008年第 25卷第 11期 兔病毒性出血症的 ，口 李 峰 ，杨 慧 ，苗立中’，沈志强 ’ (1．山东省滨州畜牧兽医研究院，山东滨州 256600；2．山东绿都生物科技有限公司，山东滨州 256600) 中图分类号：$858．291 文献标识码 ：C 文章编号 ：1005—944X(2008)11—0043—02 兔病毒性出血症 (Rabbithemor． 1．2．2 细菌学检查：取无菌采集病兔 法提取 RNA后 ．按照胡应东等方法[31 rhagiedisease，RHD)又称兔瘟 ．是 由 肺脏 、肝脏组织做触片镜检 ，并分别 进行 RT—PCR反应 PCR反应条件 兔病毒性 出血症病毒引起的一种急 接种于鲜血琼脂平板和肉汤．置 37℃ 为 ：94oC45s．55℃ 45s．72oC45s，35个 性、烈性传染病 ，易感兔发病率、死亡 温箱培养24h 循环后．于72℃延伸 5min。 率高达40％一90％ 该病 自1984年首 1．2．3 红细胞凝集试验：将无菌采集 2 试验结果 次在我国江苏省发现以来 l【】．国内外 的病死兔肝脏 、脾脏 ．在乳钵 内研磨 2．1 病理剖检：先后剖检病死兔 6 均有相关的报道．该病的发生和蔓延 成 1：10的混悬液．冻融 1次后 ．4000 只．发现病死兔呈角弓反张 ．均出现 给世界养兔业造成了巨大的损失 转／min离心 15min．取上清液备用。另 喉头出血、气管环出血 、肺脏出血、肾 随着养兔业的发展 ．该病也呈现 取健康兔的肝脏。依上法制成悬液 ．脏有出血点．有 3／6气管 内有含血泡 出一些新的趋势．如发病 日龄提前 ． 作为对照 将保存的人O型血经离心 沫，4／6肝脏淤血、肿大、质脆 ，5／6脾 有的在2月龄前即出现发病：非典型 制成 1％红细胞悬液备用 按照血凝 脏淤血、肿大，3／6膀胱积尿。同时，据 RHD病例增多等 ．对该病的诊断和 试验方法圆进行测定 场主介绍 ，发病后病兔死亡前尖叫、 防控提出了更高的要求 笔者近 日通 1．2．4 红细胞凝集抑制试验：将上述 咬笼。据此 ．初步判断为RHDV感染。 过对山东某兔场送检病死兔进行 了 病料测出凝集效价后 ．配制 4单位凝 2．2 细菌学检查：对无菌采集病兔肺 系统的病理剖检和实验室诊断．确诊 集抗原备用。取 96孔 U形板一块．1— 脏 、肝脏组织做触片镜检。没能发现 发病病原为RHDV．现报告如下。 12孔依次加入 501xl生理盐水．在第 有细菌：接种的鲜血琼脂平板和肉 1 材料与方法 一 孔内加入 501xl1：10RHD标准高免 汤．置 37℃温箱培养 24h后 ．鲜血琼 1．1 材料 血清．从第2孔开始倍比稀释至第 9 脂平板无菌落长出．肉汤无浑浊及颜 1．1．1 病料：山东某兔场送检的病兔 孔 ，弃去 50l。第 1O孔加入 50l 色变化。 1．1．2 培养基 ：鲜血琼脂平板 、马丁 RHD标准阴性血清 然后 1—11~LJJu 2．3 红细胞凝集试验：对6只病死兔 肉汤．按常规方法 自制。 人 501xl4单位病毒．混匀后 37℃作 的肝脏分别作为独立的样本进行 了 1．1．3 人0型血：滨州市血站提供 用30min。1—12孔 ．每孔加入 1％红细 试验．其红细胞凝集效价均在 10~24 1．1．4 试验动物：6只 3月龄健康 胞悬液 501~1，震荡混匀后 ．置 37℃温 以上 ．其中最高的达 lOx26。健康兔对 RHD血清抗体阴性兔 ．山东绿都生 箱 30min。观察结果 照组无血凝性 物科技有限公司试验动物中心提供 1．2．5 动物 回归试验：将 6只试验用 2．4 红细胞凝集抑制试验：将测定出 1．1．5 试剂：分子生物 学试剂购 自 兔分为2组 ．实验组4只。每只按照 红细胞凝集效价的悬液用生理盐水配 TaKaRa公司：RT—PCR反应引物 由上 lm g体重 ，肌肉注射经加双抗处理 制成4单位凝集抗原．进行红细胞凝 海生工生物有限公司合成