包埋ADR的能力依赖于PAMAM代数和M-PEG链数.PPT

Micelle-5000比Micelle-2000的增溶能力差，原因： 高浓度下，PEG2000链比较长，分子间发生聚集，导致细胞毒性增大 文章思路： 基因载体中的病毒载体：有毒性，免疫原性，转染效率低； PAMAM末端阳离子很容易与DNA 中带负电的磷酸基相互作用； PAMAM内部有空腔，促进DNA结合的复合物的稳定性 PAMAM增加DNA转染效率； PEG增加生物相容性，降低毒性和免疫原性。 在偏碱性环境下，NHS-PEG-tBOC的一NHS端很容易与PAMAM表面氨基共价结合为稳定的酰胺键。 NHS- PEG3400-NH-tBoc PAMAM-PEG3400-NH-tBoc 硼酸盐缓冲溶液，pH = 8.0 SuperFect 是目前可用的转染效率最好的试剂之一 三氟乙磺酸化的PEG 月桂酰氯 pH=8.0 TEA 人结肠腺癌细胞 MTT法测细胞毒性 IC50：concentration at which 50% inhibition of mitochondrial dehydrogenase （线粒体脱氢酶）activity， IC50值越大，毒性越小 用粗粒度的分子动力学模拟（coarse-grained (CG) molecular dynamics (MD)simulations）证明了：有长链PEG的PEG-PAMAM分子间没有发生聚集，而是阻止聚集。 TG4P5000 -60有相似的现象 PEG密度较大时，PEG链非常拥挤，向水中伸展的趋势更大 8PEG5000-G4 32PEG5000-G4 分子间聚集，引起PEG互穿 32PEG5000-G3 占据空腔，使空腔变小，包埋药物能力下降 不是分子间聚集，而是PEG自穿 * PAMAM的PEG化 组会汇报 一、为什么要对PAMAM dendrimer进行 PEG化？ 树枝状大分子： 由中心核(core)、内层重复单元(repeatunits)以及外层端基(end groups)组成。由多步重复的方法合成，有高度对称、高度支化、单分散、精确的分子结构、外部带有大量的官能团、内部具有空腔、分子量可控以及纳米尺寸等多种独特性质，是一类三维高度有序并且可以从分子水平上控制、设计分子的大小、形状、结构和功能的新型高分子化合物。 其外层多种官能团，可同时连上药物、靶向基团以及各种修饰基团。内部疏水空腔可包埋疏水性的药物，而其表层亲水性的基团从而增加药物的溶解度（大量的末端官能团和内部空腔，具备包裹药物的能力，可与药物通过共价键结合形成轭合物（conjugates）或非共价键作用、孔腔包埋形成包合物）。 树枝状大分子在与药物分子的作用过程中，不仅能够增加其溶解度，并且通过静电力等非键合力或键合力与其相结合，可以对药物起到缓释和控释及介导药物靶向输送的目的。 聚酰胺一胺树枝状大分子(Polyamidoamine ，PAMAM)： 是目前研究最为广泛 和成熟的一类树枝状大分子，目前已合成到10代。 是以乙二胺和丙烯酸甲酯为重复单元通过反复的Michael加成和酰胺化反应可得到不同代数(Go代～G10代)的树枝状大分子。 每重复反应 一次增加一代，表面氨基数增加一倍。 PAMAM具有一般树枝状大分子的结构特点跟优点，具有稳定、良好的生物相容性、无免疫原性、末端氨基可以用来结合靶向或客体分子，也可以对其功能化得到更有效、对生物活性物质转运效率更高的树枝状大分子等优点。 PAMAM作为药物载体，与其它线性载体分子比较具有明显的结构优势：首先，其表面有大量的官能团，经过表面修饰可连接大量药物分子；其次，G3代以上的PAMAM空间呈球状分布， 内部存在较大空腔，可以包埋药物分子，经表面修饰 后的PAMAM可提高其载药量。 除了可作为药物载体，PAMAM树状大分子在基因转染、磁共振成像造影等领域也有很大的进展。 但整代PAMAM树状大分子表面具有的大量末端氨基，在生理pH条件下易质子化而带正电，使其具有一定的细胞毒性和溶血毒性（且毒性有代数依赖性），在体内与细胞产生非特异性的吸附 ，因此其体内应用受到限制。 聚乙二醇(Polyethylene glycol） 优点：具有良好的水溶性，稳定性，生理惰性、温和性，与许多有机溶液有良好的相溶性；具有柔韧的亲水性长链结构，可以生物降解；无毒；无免疫原性；好的药物动力学；好的生物分布 经PEG修饰后，许多药物载体或蛋白质在体内的药物动力学性质都发生了显著改变，血浆半衰期明显延长，肾清除率显著降低。目前认为这种变化主要是基于以下3点： (1)许多经静脉给药的纳米药物载体或蛋白质很快被网状内皮组织、肾、肝、脾消除，这种消除依赖于其分子的大小、电荷及与特定细胞内受体的亲和力，而用PEG修饰后，上述性质