鼠源性抗体.ppt

 抗体是机体对抗原刺激发生反应，由浆细胞产生的一种免疫球蛋白。它能特异性地识别相应的抗原物质并与之反应。抗体药物就其发展历程及制备技术可分为三类： 鼠源性抗体 从超免疫的供体中即抗原免疫的小鼠获取脾细胞，再与骨髓瘤细胞融合，最后对单个细胞进行克隆，培养出能分泌单抗的克隆细胞。 嵌合抗体 用人源基因代替鼠源单抗的恒定区。这样构建的嵌合抗体不仅保留了抗原抗体结合的特异性，又大大降低了鼠源单抗的免疫原性。 人源化抗体 由于嵌合抗体异源性仍然很大，因此需要对鼠源抗体进行人源化改造，进一步人源化的方法很多，主要是重构抗体和表面重塑技术。 重构抗体就是互补决定区(eomplementari—ty determining region，CDR)移植，将鼠抗体的CDR移植到人抗体的相应部位。这样人源化程度可达90％以上，目前该方法是人源化单抗最常用、最基本的方 表面重塑技术即将鼠抗体框架区表面氨基酸的残基(surface amino acid residues，SAR)进行人源化改造。该方法是仅替换与人抗体SAR差别明显的区域，在维持抗体活性并兼顾减少异源性基础上选用与人抗体表面残基相似的氨基酸替换。 人源性抗体 虽然人源化抗体解决了鼠抗体的免疫原性等问题，但生产人源化抗体仍有很大的困难；人源化过程需大量繁复、昂贵的电脑模拟，需取代不同的氨基酸以恢复选择性和亲和力，工作量非常大，并且它总还含有少量鼠源性成分。完全的人源性抗体才是用于治疗的理想抗体， 目前它主要通过3种途径来研制：噬菌体抗体库技术、核糖体展示技术和转基因小鼠制备人源性抗体。 域抗体( domain antibodies，DAbs) 一直到 1989 年，所有的抗体被认为都是由两个重链和两条轻链组成，两条重链通过二硫键共价连接，重链由 1 个可变区VH 和 3 个恒定区 CH1 和 CH2 和 CH3 组成，轻链由一个可变区VL和恒定区组成CL，并且与重链的 CH1 区非共价连接。1989 年，一种新型抗体首先在单峰骆驼的血清中被发现鉴定，后来在骆驼家族所有其他种群中都有发现。这种抗体不包含轻链，重链中不含有 CH1 区。直到今天，这种重链抗体 的进化优势都不是很清楚，然而仅由重链抗体的一个重链可变区组成的单域抗体，其广泛的适用性已经被迅速认可，由于其晶体结构直径 2.5 nm、长4 nm，因此又被称为纳米抗体。 新技术的应用促进了对这种抗体药物的理解，也发现了这种小分子抗体的很多优点： ① 具有高亲和性 ② 能够识别普通抗体不能识别或不能接近的抗原 ③ 在严苛的环境下非常稳定 ④ 容易形成聚体形式 ⑤ 易表达 抗体-药物共轭体( antibody drug-conjugates，ADCs) 它是由一个合成接头共价连接一个单克隆抗体与一个细胞毒类化学物质构成，这样 ADC 就融合了单克隆抗体对肿瘤相关抗原的高度特异性和小分子毒性物质对肿瘤相关抗原的毒性效应，加强毒性物质对肿瘤细胞攻击效率的同时，避免了化学疗法中毒性物质对正常的组织细胞非特异性杀伤而引起的不良反应。 双特异性抗体( bispecific antibodies，BsAb) 简单来说，双特异性抗体就是可以与两个不同抗原靶点特异性结合的抗体融合体。 早期对 BsAb 的研究侧重于将一个特异性抗原与效应细胞连接起来，例如，一个 BsAb 既特异性地与肿瘤细胞上抗原结合，同时又与 T 细胞上 CD3 抗原或者 NK 细胞上的 CD16 抗原结合，这样 BsAb 交叉连接了肿瘤细胞与效应细胞，同时激活了效应细胞。 最近一个新概念的 BsAb 得到了人们的极大关注，它同时结合一种疾病相关的两个靶抗原，这样BsAb 可以与相同疾病发生途径中的不同靶点抗原结合，阻滞和中和作用都增强了，而且可以阻断单抗药物单一靶点疗法中出现的代偿现象。 BsAb 还可以与同一个靶抗原的不同抗原决定簇结合，不仅使亲和力加强，而且加强了抗体依赖的效应作用如抗体依赖的细胞毒作用和 / 或补体依赖的细胞毒作用。 三功能抗体( trifunctional antibodies，TriomAb) 三功能抗体除具有两个不同抗原结合位点，还具有完整的 Fc 片段，其两个抗原通常是 T 细胞上的CD3 和肿瘤细胞上的抗原，这使它成为双特异性单克隆抗体的一种。 Fc 工程抗体( Fc-engineered antibodies) 现在