大脑切片图.docx

切片方法如下图，在切片之前首先要用刀片对SD大鼠脑进行粗切，可平分为5段，粗切之后进行切纹状体，海马，黑质的精细切分。1：纹状体和黑质的切法：切除小脑和嗅球（保险起见用刀片切除1，和6的位置）；然后从3处切开（即大约整体的2/5处），1~3区为黑质，3~6区为纹状体，黑质和纹状体都是以3处处的剖开面为底面用胶水固定在切片机小圆板底座上。2：海马的切法：切除小脑和嗅球（保险起见用刀片切除1，和6的位置），保险起见海马保留2~4之间的区段（用刀片切在2和4的位置）然后以处的剖开面为底面用胶水固定在切片机小圆板底座上。具体切片方案如下根据大鼠脑立体定位图谱(第三版)在PD模型中，所需部位主要为鼠大脑的纹状体、黑质以及海马部位:⑴纹状体区:前囟1.70mm至-0.4mm,共2.10mm,由前往后平均分为以下四个区间(每区段0.5mm): +1.70mm---+1.20mm, +1.20mm---+0.70mm, +0.70 mm ---+0.20mm，+0.20mm--- -0.40mm，+1.70mm---+1.20mm,+1.70mm---+1.20mm, +1.20mm---+0.70mm, +0.70 mm ---+0.20mm，+0.20mm--- -0.40mm，可分为四个小瓶来装片，于10ml 的棕色玻璃瓶中( 内盛6ml的0.01mM PBS,pH7.4配制的5%多聚甲醛溶液 ),每个区段长度为0.50mm，理论上可切30μm的脑片16张，实际保留时至少保证12张脑片。并从前到后标明区段1(+1.70mm-+1.20mm),区段2(+1.20mm-+0.70mm),区段3(+0.70mm-+0.2mm),区段4(+0.2mm-- -0.4mm).⑵黑质区:前囟-4.52mm至-6.04mm,共1.52mm,理论上一共可切56张30μm的脑片。进入脑区-4.16mm后,先连续切100μm的脑片共3片,接着切30μm的脑片共2张,均不保存，理论上此时已到-4.52mm的脑区位置。开始脑区位置-4.52mm- -4.8mm为一个备用脑片区段，共0.28mm理论上该区段可切9片脑片。从-4.8mm开始到-6.04mm, 共1.24mm，分为四个区段（每区段0.31mm），每个区段至少保留8片。-4.8mm--- -5.11mm-5.11mm--- -5.42mm-5.42mm--- -5.73mm-5.73mm--- -6.04mm(3) 海马区