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BK病毒荧光定量试剂盒中文说明书
北京思尔成生物技术有限公司
BK 病毒荧光定量试剂盒
目录
1. 试剂盒组成
2. 贮藏条件
3. PCR 的准备
4. 实验所另需准备的材料与仪器
5. 操作步骤
A
北京思尔成生物技术有限公司
地址:北京经济技术开发区宏达北路 10号万源商务中心 5001 室
电话:400-650-1950 传真:010602
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试剂盒组成
简写R=试剂, S1~S5=定量标准品, w=超纯水
(不同试剂的管帽颜色不同,以便于区分)
贮藏条件
所以试剂应在-20℃贮藏,在此温度下可保证效期内的试剂质量。避免反复冻融,这样会降
低试剂的敏感度。可把试剂分装成多份,以便使用。在4 ℃下放置不宜超过2 小时
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PCR 的准备
以下步骤需小心
把阳性的样本(标本,标准品,质粒 )与试剂分开存储。并且分开加样。
使用前,把所有试剂在室温下放置至溶解。
溶解后,把试剂混匀并短暂离心。
冰上操作
包括NTC 在内的所有试剂(除了标准品和标本)都应该在扩增前区内加样和混匀
标准品和标本应该在样本提取区内混匀加样
使用带滤芯的枪头
使用无粉一次性手套
实验所另需准备的材料与仪器
DNA 提取试剂盒(见8.a DNA 提取)
不同规格的枪头
无粉一次性手套
混匀仪
离心机
荧光定量PCR
Real –Time PCR 的原理
本实验应用Taqman 探针技术。在PCR 过程中,正向和反向引物与模板结合,Taqman 探针,
也在反应的混合液中。它的5’带有一个荧光报告基团,3’端带有一个淬灭基团,通过探针的
特异性序列,可以结合到PCR 的产物上。Taq 酶具有5’-3’ 的外切酶活性,在引物延伸过程中,
探针5’端的报告基团会被切下,发出荧光信号。因此,反应过程中收集到的荧光信号强度对
应着起始的模板量。
试剂盒简介
该试剂盒是应用于BK 病毒的荧光定量检测。Master mix 中包含了反应所需的酶及其他组分。
此外,试剂盒还提供了5 个梯度的标准品,供检测使用。
操作步骤
DNA 提取
可以使用任意DNA 提取试剂盒,请按所用试剂盒的说明书操作。推荐使用以下的DNA 提取
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