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利用酵母双杂交系统筛选雷竹soc1 相互作用蛋白 - 生物技术通报
生物技术通报
·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( )
2016, 32 8 :207-213
利用酵母双杂交系统筛选雷竹 SOC1 相互作用蛋白
潘现飞 施泉 林新春 徐英武 曹友志
(浙江农林大学 亚热带森林培育国家重点实验室培育基地,临安 311300)
摘 要 : 在雷竹 ( )中找到 ( )在开花途径
Phyllostachys violascens SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CONSTANS1 SOC1
中的作用靶标,进一步探索SOC1 的作用机制。构建pGBKT7-PvSOC1 诱饵表达载体,通过SMART 技术构建开花时期的雷竹cDNA
文库,酵母双杂交筛选与SOC1 互作的蛋白,并对其进行分析鉴定。结果显示,成功构建了可用于酵母双杂交的cDNA 文库,文库
的转化率为每微克pGADT7-Rec 3.0×106 6
转化子,文库滴度为7.5×10 cfu/mL,插入片段主要在250-2 000 bp 之间。通过酵母双杂
交实验得到与诱饵蛋白PvSOC1 相互作用的蛋白,筛选到的靶标蛋白经鉴定是一个富含亮氨酸的蛋白激酶,特征氨基酸序列在不同
物种中非常保守,与水稻中的同源蛋白亲缘性最高。
关键词 : 雷竹;SOC1 ;cDNA 文库 ;酵母双杂交 ;蛋白质互作
DOI :10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.08.030
Screening for the Interaction Proteins of SOC1 from Phyllostachys
-
violascens Using Yeast Two Hybrid System
PAN Xian-fei SHI Quan LIN Xin-chun XU Ying-wu CAO You-zhi
(The Nurturing Station for the State Key Laboratory of Subtropical Silviculture ,Zhejiang A F University ,Lin ’an 311300 )
Abstract: This work aims to study the target proteins of suppressor of overexpression of constans1(SOC1 )in flowering way of
Phyllostachys violaceus and to explore the action mechanism of SOC1. The pGBKT7-PvSOC1 vector was constructed as the bait protein,then
the cDNA library of flowering was established using SMART technology,and the interaction proteins with SOC1 were screened
P. violascens
by yeast two
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