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[hexa(±2s)-glcnac]n epitopes in heparan sulfate(同代中产生的一
糖组学 糖足学研究的对象是聚糖,包括聚糖的结构和功能两方面,而聚糖往往和蛋白质相连,为了更好地与蛋白质组学相连,将研究对象锁定为糖肽。糖组学研究的重点包括: (1)编码糖蛋白的基因; (2)实际糖基化的位点; (3)聚糖结构; (4)糖基化作用 糖基化位点的研究 基因组计划提供了基本的遗传信息,而许多基因的功能仍需要阐明。其中的关键就是蛋白质的翻译后修饰,而糖基化是最主要的翻译后修饰之一 .细胞中的蛋白质即使经历相同的糖基化机制和分泌途径,也并非所有的潜在位点均可被糖基化,对糖基化位点进行研究有助于理解微生物感染的机制、为抗感染药物的开发提供靶位。 糖链功能的研究 糖链一般由相同或不同型的单糖聚合而成,可独立存在,也可与配基结合成更复杂的复合体。糖结构的复杂性远远高于蛋白质和核酸.但具有诸如细胞间通讯、蛋白折叠、细胞吸附和免疫识别等生物过程中都起核心作用,影响到细胞发育、分化、形态、肿瘤转移、微生物感染等。 水溶性 糖分子的水溶性极高,与蛋白质或脂肪大分子结合,可大大提高这类分子的亲水性能并改善分子的疏水一亲水平衡点,更重要的是改善蛋白质的功能以及其他理化性能,如分子表面的电荷分布、酸碱性能、分子粘度和分子构型等 糖链操作技术的研究 糖蛋白及糖链的分离纯化 必威体育精装版发展的用于糖组的分离纯化的技术有:糖捕获技术、糖微阵列技术、化学选择糖印迹技术、激光微裂解技术等糖链的标记 因为糖自身没有发色基团,为了在分离纯化和结构鉴定中能够更有效地检测到糖链,往往要对其进行标记或衍生化,目前用于标记糖的技术主要有放射性同位素标记、探针标记等。 糖链的结构鉴定必威体育精装版发展的用于糖组结构鉴定的技术主要有:基质辅助激光解吸离子化飞行质(MALDI—TOF_Ms)、电喷雾质谱(ESI—MS)、傅立叶转换离子回旋共振质谱(FTICR)、核磁共振(NMR)、芯片技术、生物信息学法等。 2.5 问题 存在的主要问题如下:其一,目前采用不同手段研究糖苷的功能,已取得一定进展。但糖链不像核酸与蛋白质那样有合成的模板,有一定规律可循;免疫细胞对不同糖苷的识别规律,识别不同糖苷后免疫应答和信号传导还不清楚,还有许多复杂和未知的机制有待探索。 其二,糖链具有重要的生物功能,在预防和治疗肿瘤、爱滋病等顽症上已显示出诱人的前景,但糖链对这些疾病的作用机制尚不清楚; 其三,开展糖链结构与功能研究,结构测定是基础; 其五,生物信息学的发展促进了蛋白质组学和基因组学的发展,但是,由于糖链结构的复杂性,用于基因组学和蛋白质组学的生物信息学算法和技术都无法直接用于糖组学。 Generation and characterization of a series of monoclonal antibodies that specifically recognize [HexA(±2S)-GlcNAc]n epitopes in heparan sulfate(同代中产生的一系列抗体特异识别硫酸乙酰肝素中的[HexA(±2S)-GlcNAc]n 表位) Suzuki and Yamamoto 摘要 1 用匙式血蓝蛋白共轭多聚糖感染小鼠获得5种AS(17,22,25,38,48)单克隆抗体,一种ACH55抗体,3种NAH(33,43,46)抗体。 2 AS识别acharan sulfate (IdoA2S-GlcNAc)n ACH识别acharan (IdoA-GlcNAc)n NAH识别N-acetyl-heparosan (GlcA-GlcNAc)n 3 利用包含化学修饰的肝磷脂的生物素酰化黏多糖做特异性检测发现这些抗体只结合使小鼠免疫的多聚糖,而不结合硫酸软骨素,硫酸角质素,软骨素和透明质酸 4 AS抗体不结合硫酸乙酰肝素和肝磷脂,但不同程度上结合6-O-desulfated(脱硫)N-desulfated and re-N-acetylated(乙酰基)肝磷脂 ACH55抗体结合tri-desulfated and re-N-acetylated(乙酰化)的肝磷脂而不结合其他化学修饰的肝磷脂。 NHN抗体不结合肝磷脂和化学修饰的肝磷脂但不同程度上结合硫酸乙酰肝素。NHN43和NHN46也部分结合N-de-acetylated N-acetyl-肝素。 5 在老鼠小脑内抗体的免疫组织化学分析,NHA46染色内皮,ACH55和AS25 染色分子层,此外ACH55特异性染色浦肯野细胞。 6 结果表明IdoA2S-GlcNAc and IdoA-GlcNAc在神经系统的特殊部位少有表现。 介绍 很少的单克隆抗体用来检测硫酸乙酰肝素,主要是因为它的结构相对复杂,包括三个基本结构
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