犬细小病毒血凝抑制抗体效价胶体金免疫层析检测方法的建立及应用.pdf

中国畜牧兽医 2016 ，43(8) : 1983-1988 China Anim al Husbandry Veterinary Medicine doi ：10. 16431/j. cnki. 1671-7236. 2016. 08. 008 犬细小病毒血凝抑制抗体效价胶体金免疫层析 检测方法的建立及应用 马永缨，孙 明 ，申屠芬琴，孔汉金，杨欣艳，秦亚媞，陈 西 钊 贾 红 ( 北京世纪元亨动物防疫技术有限公司，北 京 1〇〇〇94) 摘 要 ：试验旨在利用胶体金免疫层析技术建立快速检测犬血清中犬细小病毒（ca n in ep arv o v in i^ C P V )血凝抑制 ( 1 ^ 1 ^ 吕吕1111;11^1〇1111111出出〇11,只1)抗体效价的方法，用 于 0 ? \ ^ 疫苗免疫效果评价。采用双抗体夹心法，以抗 0 ? \^ 血凝相关抗原的单克隆抗体制备C P V 抗原检测试纸条；将犬血清进行不同比例系列稀释后，分别与定量 C P V 抗 原充分反应，滴人 C P V 胶体金试纸条，根据试纸条检测线（ test line ，T 线）消失时的血清最高稀释倍数判断血清中 C P V 抗体的 H I 效价；用此方法检测 8 6 份犬血清样品，并与传统血凝抑制试验方法进行分析比较。结果显示，成功 制 备 C P V 抗原检测试纸条，确定了试纸条检测犬血清C P V -H I效价的反应条件和结果判定标准。结果表明，在检 测不同稀释倍数犬血清反应后的C P V 抗原时，能使试纸条 T 线消失时的血清最高稀释倍数与H I 效价具有正相关 性 ，犬血清最高稀释倍数乘以4 即为 H I 效价；两种方法的符合率达 90. 7% 。本试验初步建立了胶体金试纸条检测 C P V 血凝抑制效价的方法，为检测 C P V -H I效价提供了一种操作简单、快速的试验方法，可 用 于 C P V 疫苗免疫效 果评价。 关键词：犬细小病毒；胶体金；试纸条;血凝抑制效价 中图分类号：S855. 3 文献标识码：A 文章编号：1671-7236(2016)08-1983-06 Establishment and Application of Colloidal Gold Immune Chromatography Test Method for Detection of Canine Parvovirus Hema lutination Inhibition Antibody Titer MAYong-ying, SUN Ming, SHEN TU Fen-qin, KONG Han-jin, YANG Xin-yan, QIN Ya-man， CHEN Xi-zhao% JIA H 〇ng {Beijing Anheal Laboratories Co. ，Ltd. ? Beijing 100094? China) Abstract ：The study was aimed to use colloidal gold immune chromatography technology to estab­ lish a rapid method for detection of canine serum canine parvovirus (CPV) hemagglutination inhi­ bition (H I) titer and CPV vaccine immunization effect assessment. Double antibody sandwich method and monoclonal antibodies of anti-CPV h