“班菲”脐橙果皮油斑病相关基因的分析.pdf

※生物工程 食品科学 2013, Vol.34, No.17 219 “班菲”脐橙果皮油斑病相关基因的分析 1 2 1 1 2 1 1,* 魏召新 ，程春振 ，程昌凤 ，吴纯清 ，朱世平 ，漆巨容 ，洪 林 (1.重庆市农业科学院果树研究所，重庆 402260 ；2.西南大学柑桔研究所，重庆 4007 12) 摘  要：柑橘油斑病作为一种普遍发生的柑橘病害，严重影响着果实的外观和商品价值。以晚熟脐橙“班菲”为材 料，利用抑制差减杂交技术分别构建油斑病诱导的正反向cDNA文库。文库插入片段多在100～700bp之间，从正反 向文库中各随机挑取了150个菌液PCR检测为阳性的克隆进行测序，成功获得了有效ESTs序列292条。通过BLASTx E -3 序列比对，有165条ESTs找到了55个基因的同源序列，且 值小于1.0 ×10 。GO功能归类结果表明：这些差异表达 的ESTs主要涉及氧化还原、抗逆防御、生物和非生物胁迫等多种相关的生物学过程，推测油斑病的形成与氧化胁 迫有关。 关键词：柑橘油斑病；抑制性差减文库；差异表达基因；氧化胁迫；实时定量PCR Genetic Analysis of Oleocellosis in Navel Orange ‘Banfield’ 1 2 1 1 2 1 1,* WEI Zhao-xin ，CHENG Chun-zhen ，CHENG Chang-feng ，WU Chun-qing ，ZHU Shi-ping ，QI Ju-rong ，HONG Lin (1. Fruit Research Institute, Chongqing Academy of Agricultural Sciences, Chongqing 402260, China ； 2. Citrus Research Institute, Southwest University, Chongqing 4007 12, China) Abstract ：Oleocello si s, a widely di stributed citru s di sease , h as a significant imp act on the appear ance and commercial value of citru s fruit s. To clarify the molecular mechani sm of citru s oleocellosi s, both forward and rever se cDNA suppression subtractive hybridization libraries were con structed u sing RNA extracted from navel oranges ‘Banfield’ with oleocellosi s and healthy ones. Result s showed that the length of maj ority of the in sert s r anged fr om 100 to 700 bp . A tot al of 292 clone s wer e succe ssfully sequenced