埃兹蛋白在转化生长因子-β 诱导的支气管上皮细胞间充质转化中的作用.pdf

• 280 • Chinese Journal of Respiratory and Critical Care Medicine, May 2017, Vol. 16, No.3   ·论　　著· 埃兹蛋白在转化生长因子-β 诱导的支气管 上皮细胞间充质转化中的作用 贾嫚，闫小逸，姜洁，孟亚奇，许家艳，姚欣 南京医科大学第一附属医院呼吸科（江苏南京  210029 ） 【摘要】   目的    探讨埃兹蛋白（ezrin ）在支气管上皮细胞（16HBE）间充质转化（EMT ）中的作用。 方法    建 立转化生长因子-β （TGF-β ）诱导的 16HBE 的 EMT 模型；RT-PCR 和 Western blot 法检测 16HBE 中 ezrin mRNA 和 蛋白表达；通过慢病毒 shRNA 抑制 ezrin 表达，观察细胞形态，检测细胞 EMT 的生物标志分子上皮钙黏着蛋白 （E-cadherin ）、波形蛋白（vimentin ）和 α-平滑肌动蛋白（alpha smooth muscle actin ，α-SMA ）的 mRNA 和蛋白表达 水平；加入外源性 ezrin 蛋白，细胞免疫荧光、RT-PCR 及 Western blot 法检测其对 EMT 标志物的影响。 结果    TGF-β 能下调 16HBE 中 ezrin 的 mRNA 和蛋白表达。经 ezrin 敲减后，同 TGF-β 刺激表现相同，16HBE 也由典型的铺路 石样变为梭形，同时其 E-cadherin 表达下降，vimentin 和 α-SMA 表达增加；加入重组蛋白 ezrin 后，16HBE 的 E-cadherin 表达增多，vimentin 和 α-SMA 表达下降。 结论    TGF-β 可能通过下调 ezrin 表达促进 16HBE 发生 EMT 。 【关键词】  支气管上皮细胞；上皮间充质转化；转化生长因子-β ；埃兹蛋白 The effects of ezrin on transforming growth factor beta mediated epithelial mesenchymal transition JIA Man, YAN Xiaoyi, JIANG Jie, MENG Yaqi, XU Jiayan, YAO Xin Department of Respiratory Medicine, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, Nanjing, Jiangshu 210029, P.R.China Corresponding author: YAO Xin, Email: yaoxin@njmu.edu.cn 【Abstract 】 Objective    To investigate the effects of ezrin on transforming growth factor beta (TGF-β) mediated epithelial mesenchymal transition (EMT). Methods    Human bronchial epithelial 16HBE cells were stimulated by TGF-β to induce EMT. The mRNA and protein levels were analyzed by RT-PCR and Western blot. Lentivirus (LV)-Ezrin-shRNA was employed to investigate the effects of ezrin deficiency on cell morphology and expressions of EMT associated biomarkers including E-cadherin, vimentin, and alpha smooth muscle actin (α-SMA). The effects of recombinant ezrin protein on 16HBE were also examined. Results    The expression of ezrin was down-regulated in 16HBE activated by TGF-β.