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重组人长效促卵泡激素fsh ̄ctp 的纯化工艺研究及 - 生物技术进展
生物技术进展 2016年 第6卷 第3期 219~223
研究论文
Current Biotechnology ISSN2095 ̄2341 Articles
重组人长效促卵泡激素FSH ̄CTP 的纯化工艺研究及鉴定
刘晓航ꎬ 高丽婷
北京双鹭药业股份有限公司ꎬ北京 100143
摘 要: 为了获得高纯度的重组人长效促卵泡激素FSH ̄CTPꎬ收集表达FSH ̄CTP 的CHO细胞培养上清ꎬ经过染料亲和
层析、DEAE 阴离子交换层析以及疏水层析三步层析制备ꎬ所得样品进行分子量、等电点测定和Western Blot 鉴定ꎬ雌性
大鼠卵巢增重法测定体内生物活性ꎮ 结果显示:经3步纯化所得样品纯度可达98%以上ꎬ表观分子量约为47 kDaꎬ
MALDI ̄TOF ̄MS测得结果为35.2 kDaꎬ等电点4.0~2.8ꎬWestern Blot结果呈阳性ꎬ测活结果表明ꎬFSH ̄CTP 的活性比重组
人卵泡刺激素明显偏高ꎮ 纯化所得样品纯度良好ꎬ为该药物的进一步研究打下了基础ꎮ
关键词: 不孕不育症ꎻFSH ̄CTPꎻ分离纯化ꎻ雌性大鼠卵巢增重法
DOI:10.3969/j.issn.2095 ̄2341.2016.03.12
Research and Appraisal on Purification Process of Recombinant Human
Long ̄acting Follicle Stimulating Hormone
LIU Xiao ̄hangꎬGAO Li ̄ting
Beijing SL Pharmaceutical Co. Ltd.ꎬBeijing 100143ꎬChina
Abstract:To obtain high purity recombinant human long ̄acting follicle stimulating hormone FSH ̄CTPꎬthe study collected the
CHO cells culture supernatant contained FSH ̄CTPꎬthen it was puried by dye affinity chromatographyꎬDEAE anion exchange
chromatography and hydrophobic interaction chromatography. We detected the puried samples by molecular weightꎬisoelectric
pointꎬbiological activity in vitro (Western Blot) and biological activity in vivo (ovarian weight gain in female rats law). The
results showed that:Thepurityof FSH ̄CTP proteincouldreach98% afterthreesteptpurificationꎬtheapparentmolecularweight
was about47kDaꎬMALDI ̄TOF ̄MSresultwas35.2kDa.Theresultsofisoelectricpointwas4.0~2.8.AndweprovidedtheFSH ̄
CTP activity was higher than recombinant human follicle stimulating hormone significantly by Western Blot analysis. The
purification and activity of FSH ̄CTP was high. The results could lay thefoundation for further study of the drug.
Key words:infertilityꎻFSH ̄CTP
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