程序化冷冻前后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎的hba - 中国实验动物学报.pdf

２０１６年１２月 中国实验动物学报 Ｄｅｃｅｍｂｅｒ２０１６ 第２４卷　 第６期 ＡＣＴＡ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＵＭ ＡＮＩＭＡＬＩＳ ＳＣＩＥＮＴＩＡ ＳＩＮＩＣＡ Ｖｏｌ． ２４　 Ｎｏ． ６ 研究报告 程序化冷冻前后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎的 Ｈｂａ⁃α蛋白分布和差异表达 刘迪，倪和民，顾美超，李征，王力红，盛熙晖，齐晓龙，王相国，郭勇∗ （北京农学院动物科学技术学院／ 兽医学（中医药）北京市重点实验室，北京　 １０２２０６） 　 　 【摘要】　 目的　 利用程序化冷冻的方法，探究冷冻前、后小鼠孵化囊胚和休眠胚胎中Ｈｂａ⁃α蛋白的分布和差 异表达的变化，为今后开发和利用新型哺乳动物源抗冻蛋白提供理论依据。 方法　 从妊娠ｄ５小鼠体内获取孵化 囊胚；从小鼠延迟着床模型获取休眠胚胎，利用 Ｃｏｎｆｏｃａｌ显微镜和Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ技术对程序化冷冻前、后的各组胚 胎进行Ｈｂａ⁃α蛋白的分布和表达检测。 结果　 孵化囊胚和休眠胚胎在程序化冷冻前、后均有Ｈｂａ⁃α 蛋白的表达； 孵化囊胚经程序化冷冻后Ｈｂａ⁃α蛋白的表达与冷冻前相比差异无显著性（Ｐ ＞００５）；冷冻前休眠胚胎与程序化冷 冻前后的孵化囊胚相比，Ｈｂａ⁃α蛋白的表达量显著下调（Ｐ＜００５）；冷冻后休眠胚胎Ｈｂａ⁃α蛋白的表达量显著低于 其他各组（Ｐ＜００５）。 结论　 程序化冷冻处理对小鼠休眠胚胎Ｈｂａ⁃α蛋白的表达影响明显大于孵化囊胚；Ｈｂａ⁃α 基因具有作为新型哺乳动物源抗冻蛋白的潜力。 【关键词】　 小鼠；孵化囊胚；休眠胚胎；程序化冷冻；Ｈｂａ⁃α蛋白 【中图分类号】 Ｑ９５⁃３３　 　 【文献标识码】 Ａ　 　 【文章编号】 １００５⁃４８４７（２０１６）０６⁃０５７９⁃０６ Ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊ．ｉｓｓｎ．１００５－４８４７２０１６０６００５ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｂａ⁃α ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｎｏｒｍａｌ ｈａｔｃｈｅｄｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｓ ａｎｄｄｏｒｍａｎｔ ｅｍｂｒｙｏｓ ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄａｆｔｅｒ ｃｒｙｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ ＬＩＵ Ｄｉ，ＮＩ Ｈｅ⁃ｍｉｎ，ＧＵ Ｍｅｉ⁃ｃｈａｏ，ＬＩ Ｚｈｅｎｇ，ＷＡＮＧ Ｌｉ⁃ｈｏｎｇ，ＳＨＥＮＧＸｉ⁃ｈｕｉ， ＱＩ Ｘｉａｏ⁃ｌｏｎｇ，ＷＡＮＧＸｉａｎｇ⁃ｇｕｏ，ＧＵＯＹｏｎｇ∗ （１． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ａｎｉｍａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；２． Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０２２０６，Ｃｈｉｎａ） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ｉｓ ａｉｍｅｄｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅ ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｈｂａ⁃α ｐｒｏ⁃ ｔｅｉｎ ｉｎ ｍｏｕｓｅ ｎ