大黄素对k562／adm细胞阿霉素耐药的抑制作用 - 《中国药科大学 .pdf

学 报 ４６２ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１４，４５（４）：４６２－４６８ 大黄素对 Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞阿霉素耐药的抑制作用 １ １ １ １ ２ ３ 朱雅琪 ，严　方 ，狄　斌 ，严　佳 ，李佳常 ，李运曼 １ ２ （中国药科大学药物质量与安全预警教育部重点实验室，南京２１０００９；中国药科大学 ３ 药学医学基础实验中心，南京２１００９８；中国药科大学生理学教研室，南京２１０００９） 摘　要　探讨大黄素抑制人慢性粒细胞白血病细胞耐阿霉素变异株Ｋ５６２／ＡＤＭ的药效学及作用机制。以维拉帕米为 阳性药，阿霉素为工具药，采用ＭＴＴ法测定大黄素与阿霉素合用对细胞增殖的抑制作用；使用流式细胞仪考察了大黄素对 于阿霉素诱导Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞周期阻滞和凋亡的促进作用；并采用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ法检测了大黄素对Ｐｇｐ、ＢｃｒＡｂｌ和ＳＴＡＴ５ 蛋白表达的影响；进一步通过Ｐｇｐ单克隆藻红蛋白键合ＵＩＣ２抗体结合实验探讨了大黄素是否是Ｐｇｐ的底物。实验结果 显示，大黄素与阿霉素合用可显著抑制Ｋ５６２／ＡＤＭ的增殖，并呈量效关系；可促进阿霉素诱导的Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞Ｇ／Ｍ期 ２ 周期阻滞和细胞凋亡；不同剂量的大黄素可有效抑制Ｐｇｐ、ＢｃｒＡｂｌ、ＳＴＡＴ５蛋白表达及磷酸化；ＵＩＣ２抗体结合实验结果则 表明大黄素可能不是Ｐｇｐ的底物。因此，大黄素能够在体外有效抑制 Ｋ５６２／ＡＤＭ阿霉素耐药，其机制可能不是通过底物 竞争性抑制作用，而是与大黄素直接降低Ｐｇｐ、ＢｃｒＡｂｌ及ＳＴＡＴ５蛋白表达和磷酸化有关。 关键词　大黄素；Ｋ５６２／ＡＤＭ；耐药抑制；Ｐｇｐ；ＢｃｒＡｂｌ；ＳＴＡＴ５ 中图分类号　Ｒ９６５　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１４）０４－０４６２－０７ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ ＩｎｈｉｂｉｔｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｆｅｍｏｄｉｎｏｎａｄｒｉａｍｙｃｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＫ５６２／ＡＤＭｃｅｌｌｌｉｎｅ １ １ １ １ ２ ３ ＺＨＵＹａｑｉ牞ＹＡＮＦａｎｇ 牞ＤＩＢｉｎ 牞ＹＡＮＪｉａ牞ＬＩＪｉａｃｈａｎｇ牞ＬＩＹｕｎｍａｎ １ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＤｒｕｇＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＰｈａｒｍａｃｏｖｉｇｉｌａｎｃｅ牗ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ牘牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ ２ ２１０００９牷Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｎｄ Ｔｅａｃｈｉｎｇ ＣｅｎｔｅｒｏｆＭｅｄｉｃａｌＢａｓｉｓｆｏｒＰｈａｒｍａｃｙ牞Ｃｈｉｎａ ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ ３ ２１００９８牷ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈｙｓｉｏｌｏｇｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｔｈｅａｉｍｏｆｔｈｅｓｔｕｄｙｗａｓｔｏｅｖａｌｕａｔｅａｎｄｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｏｆｅｍｏｄｉｎｏｎｔｈｅａｄｒｉａｍｙｃｉｎ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎＫ５６２／ＡＤＭｃｅｌｌｌｉｎｅＩｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙ牞ｖｅｒａｐａｍｉｌａｎｄａｄｒｉａｍｙｃｉｎｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｄｒｕｇａｎｄｔｏｏｌ