抗“o”试验.ppt

医学免疫学实验 牡丹江医学院 病原生物学教研室 实验须知 一、医学免疫学实验目的和要求 目的： 1．掌握免疫学的基本实验方法和技术操作。 2．通过实验设计和实验结果的分析，使学生掌握科学的思维方法，培养其独立分析问题和解决问题的能力，提高独立工作的能力。 要求： l．每次实验课前必须做好预习，明确实验目的、原理、方法及操作中的注意事项，避免和减少发生错误。 2．实验过程中必须持严肃认真的态度。 3．对实验结果必须进行仔细地观察和真实地记录，然后进行科学地分析，得出恰当结论。 4．独立认真完成实验报告，书写要字迹清楚，语言简练,表格清晰，画图应力求反应实物标本的原状。 5．切实遵守实验室规则。 二、实验室规则 1．进实验室必须穿白服、戴白帽，随身只许带必要的教材、实验指导、笔记本和文具等，但要置于距操作部位远离的位置。 2．实验操作应严格遵照实验指导和教师的讲授进行，以期获得正确结果. 3.实验室内不准高声谈笑、吸烟、饮食、用嘴湿润铅笔和标签等. 4.实验用过的带有传染性物质的吸管、玻片等应放在指定的消毒筒内，待消毒或废弃的物品必须放在指定地点。 5.如发生有传染性的材料污染桌面、地板、书和衣物等时，应立即报告老师，以便及时处置。 6.如将活菌碰到手上，应将手浸入来苏儿中5-10分钟，然后用自来水冲洗，如将菌液吸入口内，应立即吐出，再用0.1%高锰酸钾液漱口，必要时服用药物以资预防。 7.要爱护器材，如有损坏，必须报告老师，并在破损登记薄上登记，听候处理。 8.实验结束后，将实验台整理好，检查水、电，防止事故发生，实验材料不准带出实验室。 9.离开实验室前脱下白服，整理好，用消毒液或肥皂洗手后方可离开。 免疫学实验课要求 不许迟到、早退;请假必须由系办签字 不允许擅自窜教室，最后无成绩者后果自负 穿白大衣 按时提交实验报告 爱护实验器材（用后用水冲洗后放入指定地点），损坏者按价赔偿 课后认真打扫教室卫生（擦地面和桌面） 关掉手机 实验报告 1.实验题目 2.实验目的 3.实验原理 4.实验材料 5.实验方法 6.实验结果与讨论 实验一 实验内容 1.直接凝集反应：玻片法、试管法 2.间接凝集反应： 3.间接凝集抑制试验 4.沉淀反应： （1）单向琼脂扩散试验（示教） （2）双向琼脂扩散扩散试验 （3）对流免疫电泳试验 5.大、小吞噬：标本片 凝集反应(agglutination)是经典的血清学反应，它是指颗粒性抗原例如细菌、红细胞等与相应的抗体在适量的电解质存在的条件下，经一定时间后凝聚成肉眼可见的凝集物。参加反应的颗粒性抗原称为凝集原(agglutinogen)，抗体称为凝集素(agglutinin)。 　 根据凝集反应中抗原的性质，反应的方式又分为直接凝集反应(direct agglutination)和间接凝集反应(indirect Or agglutination)。 直接凝集反应有玻片法和试管法之分，而间接凝集反应则分为间接凝集抑制试验、反向间接凝集试验和协同凝集反应。 由于抗原、抗体结合具有高度的特异性，所以常利用凝集反应协助传染病的诊断、流行病学调查以及微生物分类、遗传研究等诸多方面。 实验原理 直接凝集反应Direct agglutination 细菌、螺旋体或红细胞等颗粒性抗原，在适当电解质存在的条件下，可直接与相应的特异性抗体结合，出现凝集的现象，称为直接凝集反应（direct agglutination）。 有玻片法和试管法之分. 实验目的： 1．掌握玻片凝集试验的操作方法，了解其特点和用途。 2．学习玻片凝集试验结果的观察方法。 　　　 实验方法 1．用记号笔在干净的载玻片上均分二格并标明1，2。 2．无菌操作，用接种环分别于一、二格内各加2～3环伤寒杆菌、痢疾杆菌诊断血清。 3．用灭菌接种环自待测菌琼脂斜面上挑取少许细菌置第一格内，搅匀。接种环灭菌后同法取待检菌置于第二格内，混匀。 4．轻轻摇动玻片，1～2分钟后观察玻片凝集现象，记录结果。 观察完毕，将玻片置于盛有消毒液的容器中。 实验结果及判定 如出现肉眼可见的均匀一致的凝集块者为阳性，仍为均匀一致乳浊液者为阴性。 　试管法－肥达试验 　　　　实验目的　 1．学习试管凝集反应试验的操作与观察结果的方法。 2．掌握血清凝集效价的定义。 实验原理 抗原与不同稀释度的抗体在试管内直接结合而出现的凝集现象称为试管凝集反应。此法是一种定量法，可采用已知抗原(或抗体)来测定人体内相应抗体（或抗原）及其含量(效价或滴度)。 本试验用已知的伤寒杆菌Ｏ、Ｈ抗原测定患者血清中相应抗体，根据凝集现象判断血清凝集效价，协助诊断