细胞化学染色及临床评价.ppt

NAP (++++) CML-NAP(-) 五、骨髓铁染色 【原理】正常人骨髓中的贮存铁主要存在于骨髓小粒和幼红细胞中，骨髓中的铁在酸性环境下与亚铁氰化钾作用，形成普鲁士蓝反应，形成蓝色的亚铁氰化铁沉淀，定位于含铁的部位，从而反映骨髓中铁的储存量。 化学反应过程为： 4Fe3+ ＋ 3K4［Fe（CN）6］→ Fe4〔Fe（CN）6〕3＋12 K+ （含铁物质） （亚铁氰化钾） （亚铁氰化铁） 【结果】 （1）细胞外铁的观察 ： 细胞外铁呈蓝色的颗粒状、小株状或团块状。 以油镜观察定级标准 （-） 无铁粒可见。 （+） 少数铁粒或铁小珠。 （++） 较多铁粒和铁小珠。 （+++） 很多铁粒、铁小珠和少数小块。 （++++） 极多铁粒、铁小珠并有很多小块，密集成堆。 正常范围：+～++，“+”占2/3，“++”占1/3。 细胞外铁 （2）细胞内铁观察： 细胞内铁指有核红细胞胞质内出现蓝色颗粒，以油镜计100个中、晚幼红细胞，记录胞质中含有蓝色小颗粒（即铁粒红细胞）的比值。并根据细胞铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布情况，将铁粒幼红细胞分为如下四型： Ⅰ型：仅含1-2个铁颗粒。 Ⅱ型：含3-4个铁颗粒。 Ⅲ型：含6-9个以上铁颗粒。 Ⅳ型：10个铁颗粒。 正常范围：30% ~ 90% ，平均60%， 多见Ⅰ型，少见Ⅱ型，无Ⅲ、Ⅳ型。 细胞内铁 （3）环形铁粒幼红细胞： 指含铁颗粒6个，其中2/3以上铁颗粒围绕核周排列成完整环形或不完整环形。 正常或非铁粒幼细贫血无环形铁粒幼细胞，铁粒幼细贫血中环形铁粒幼细胞6% 。 环形铁粒幼细胞 【临床意义】 1．缺铁性贫血时， 骨髓细胞外铁明显减少，为“一”~“士”，细胞内铁平均5.9%，仅为I型。 经有效铁剂治疗后，外铁增多。 因此骨髓铁染色是诊断缺铁性贫血及指导铁剂治疗的重要方法。 2．铁粒幼细胞性贫血时， 外铁“2＋”一“3＋”，内铁平均70%，其铁粒粗大，以Ⅱ～ Ⅳ型为主，出现较多环形铁粒幼细胞。 因此，本实验是诊断铁粒幼细胞贫血的有效方法。 MDS也可出现环形铁粒幼细胞。 3. 非缺铁性贫血 如巨幼细胞贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等骨髓铁正常或不同程度的增加。 但再生障碍性贫血不会出现环形铁粒幼细胞，可作为与MDS鉴别的参考。 4. 继发性贫血的部分患者细胞内铁可减少，但细胞外铁不减少。 教学提纲： （一）.常用血细胞化学染色 1.铁染色 2.过氧化物酶染色 3.碱性磷酸酶染色 4.α醋酸萘酚酯染色 5.过碘酸-雪夫反应 （二）.结合血细胞化学染色鉴别急性白血病类型 （三）.结合血细胞化学染色鉴别贫血类型 五.重点：过氧化物酶染色、铁染色的原理临床意义 难点：结合血细胞化学染色鉴别急性白血病类型 六.学科发展动态： 参考书目:《临床血液学及检验》第7版，许文荣人民卫生出版社，2007年7月 《全国临床检验操作规程》第3版，叶应妩，中华人民共和国卫生部医政司，2006年11月 《临床血液学细胞学图谱》第3版，刘志洁，科学出版社，2006年8月 学习网站：中华检验医学网() 七.思考题： 1.急性白血病患者一般要做哪些细胞化学？ 2.如何用细胞化学鉴定急粒及急淋？ 3.慢粒最常用的细胞化学染色是？ 4.外铁染色的临床应用。 5.为了区别红白血病与巨幼红细胞性贫血，下列首选试验是： A、POX染色 B、PAS染色 C、ALP积分测定 D、a-NAE染色 E、铁染色 6.鉴别慢性粒细胞白血病与中性粒细胞型类白血病反应首选细胞化学染色为： A、PAS反应 B、过氧化物酶染色C、非特异性酯酶染色 D、中性粒细胞碱性磷酸酶染色 E、特异性酯酶染色 7.原始细胞过氧化物酶阳性率达多少时，应考虑急非淋白血病： A、1％ B、1％-3％ C、3％-5％ D、5％-10％ E、3％ 8.细胞外铁阴性，铁粒幼红细胞占0.9%，此结果符合： A、正常骨髓铁粒染色 B、缺铁性贫血C、地中海贫血 D、难治性贫血 E、铁粒幼细胞性贫血 9.环形铁粒幼红细胞是指 10.细胞化学染色的基本步骤包括哪些？ 思考题答案 1.建议急性白血病至少应做：过氧化物酶染色、特异性酯酶染色、非特异性酯酶染色、 及过碘酸-雪夫染色。 2.POX染色是辅助判断急性白血病细胞类型的首选的、最重要的细胞化学染色，急性淋巴细胞白血病患者POX为阴性，即使是阳性，其阳性率3%