日本乙型脑炎病毒对干扰素诱导基因isg15 表达 - 吉林农业大学学报.pdf

吉林农业大学学报　 ２０１７，３９（２）：２１４～２２１ ｈｔｔｐ：／ ／ ｘｕｅｂａｏ．ｊｌａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｊｌｎｄｘｂ＠ｖｉｐ．ｓｉｎａ．ｃｏｍ 日本乙型脑炎病毒对干扰素诱导基因 ＩＳＧ１５ 表达的影响∗ １ ２ ２ ２ ２ ２∗∗ １∗∗ 杨　 晶 ，华　 涛 ，唐　 波 ，唐应华 ，侯继波 ，张道华 ，黄克和 １． 南京农业大学动物医学院，南京２１００９５；２． 江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程技术 研究中心，南京２１００１４ 摘　 要：为研究机体干扰素诱导基因对日本乙型脑炎（ＪＥＶ）感染的作用，通过ＩＦＮ⁃α和ＪＥＶ刺激猪睾丸（ＳＴ） 细胞，实时荧光定量ＰＣＲ检测Ｍｘ１、Ｍｘ２、ＯＡＳ１、ＯＡＳ２、ＰＫＲ和干扰素诱导基因⁃１５（ＩＳＧ１５）表达情况，发现除 ＰＫＲ外，其他基因相对ｍＲＮＡ量都有不同程度上升，其中ＩＳＧ１５ 上升最为显著。 ＩＳＧ１５在ＳＴ 细胞中过表达， 检测病毒基因组和滴度，结果表明：ＩＳＧ１５可显著抑制ＪＥＶ增殖；ｓｈＲＮＡ 靶向干扰ＩＳＧ１５，ＪＥＶ 病毒量上升，说 明ＩＳＧ１５在体外对ＪＥＶ 的增殖有抑制作用。 将ＪＥＶ 的Ｃ、Ｍ、Ｅ、ＮＳ１、ＮＳ２Ａ、ＮＳ２Ｂ、ＮＳ３、ＮＳ４Ａ、ＮＳ４Ｂ基因克隆 入ｐｃＤＮＡ３１真核表达载体，转染ＳＴ 细胞后Ｅ和ＮＳ３基因引起ＩＳＧ１５相对ｍＲＮＡ量显著上升，说明ＪＥＶ 的Ｅ 和ＮＳ３基因参与诱导ＩＳＧ１５ 的表达。 关键词： 日本乙型脑炎病毒；干扰素刺激基因；ＩＳＧ１５；Ｅ基因；ＮＳ３基因 中图分类号：Ｑ７８６；Ｓ８５２６５　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃５６８４（２０１７）０２⁃０２１４⁃０８ ＤＯＩ：１０．１３３２７／ ｊ．ｊｊｌａｕ．２０１６．３１７９ 引文格式：杨晶，华涛，唐波，等．日本乙型脑炎病毒对干扰素诱导基因ＩＳＧ１５表达的影响［Ｊ］．吉林农业大学 学报，２０１７，３９（２）：２１４⁃２２１． Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ Ｖｉｒｕｓ ｏｎ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ⁃ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ Ｇｅｎｅ １５ １ ２ ２ ２ ２ ２∗∗ ＹＡＮＧＪｉｎｇ ， ＨＵＡ Ｔａｏ ，ＴＡＮＧ Ｂｏ ，ＴＡＮＧ Ｙｉｎｇｈｕａ ， ＨＯＵ Ｊｉｂｏ ， ＺＨＡＮＧ Ｄａｏｈｕａ ， ＨＵＡＮＧ Ｋｅｈｅ１∗∗ １． Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００９５，Ｃｈｉｎａ；２． Ｎａ⁃ ｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｂｉｏ⁃ｐｒｏｄｕｃｔ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｊｉａｎｇｓｕ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１００１４，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ （ＪＥＶ） ａｎｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ⁃ ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ，ｓｗｉｎｅ ｔｅｓｔｉｃｕｌａｒ （ＳＴ）ｃｅｌｌｓ ｗｅｒｅ ｆｉｒｓｔ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ α ａｎｄ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｅｎｃｅｐｈａｌｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｍＲＮＡ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｍｘ１，Ｍｘ２，ＯＡＳ１，ＯＡＳ２ ａｎｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ⁃ｓｔｉｍｕｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ １５ （ＩＳＧ１５）ｗｅｒ