clpe缺陷对肺炎球菌蛋白表达的影响 - 南方医科大学学报.pdf

1533 2009;29(8)%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%南方医科大学学报(J%South%Med%Univ) · · clpE缺陷对肺炎球菌蛋白表达的影响 张 群 尹楠林 张雪梅 王 虹 刘 鑫 崔亚丽 尹一兵 胥文春 重庆医科大学医学检验教育部重点实验室 重 ， ， ， ， ， ， ， ( ， 庆 400016) 摘要 目的 了解 ClpE 对肺炎球菌蛋白表达的影响 方法 用长臂同源多聚酶链式反应(LFH-PCR)方法失活 基因 ： 。 clpE ， 用 测序鉴定缺陷菌株 通过固相 梯度双向凝胶电泳 分别分离野生菌和 缺陷菌的总蛋白质 经 PCR 、 ； pH (2D) clpE ； 凝胶银染色 软件分析获得 个菌株的蛋白质表达谱 选取差异蛋白质点进行 质谱分析 查 、PDQuest%2DE 2 ； MEDLI-TOF ， 询数据库 获取有意义的蛋白点 结果 以肺炎链球菌 的图谱为参考 与其匹配率为 挑选 个有明 D39 △ 61% 17 ， 。 ， clpE 。 显差异表达的蛋白点进行 分析 获得了 张肽质量指纹图 经数据库查询后 个蛋白点获得了有意 MALDI-TOF-MS 17 4 ， ， ， 义的结果 分别为 次黄嘌呤鸟嘌呤核糖核酸转移酶(hypoxanthine-guanine%phosphoribosyltransferase) 吡咯烷羧酸肽酶 ， ： ， (pyrrolidone-carboxylate% peptidase1) ， 甲酸 四氢 叶酸连接酶 (formate-tetrahydrofolate% ligase) 和双功能蛋 白 pyrR% (bifunctional%protein%pyrR) 结论野生菌表达蛋白的种类和数量均高于突变菌株 提示 可