斑节对虾泛素融合蛋白ubl40 基因的克隆及表达分析.pdf

广东农业科学… … … … … … … ……2016，43（4）：144-150 Guangdong…Agricultural…Sciences………………………………………………………………………………………………………………………………………………………… doi：10.16768/j.issn.1004-874X.2016.04.027 傅明骏，吴松，唐蕾，等.…斑节对虾泛素融合蛋白UbL40基因的克隆及表达分析[J].广东农业科学，2016，43（4）：144-150. 斑节对虾泛素融合蛋白UbL40基因 的克隆及表达分析 1，2 1，3 1，4 1 1 1 傅明骏 ，吴  松 ，唐  蕾 ，周发林，邱丽华，江世贵 （1.中国水产科学研究院南海水产研究所/农业部南海渔业资源开发利用重点实验室，广东…广州………510300； 2.…中国水产科学研究院南海水产研究所热带水产研究开发中心，海南…三亚………572028； 3.上海海洋大学水产与生命学院，上海………201306；4.华南农业大学动物科学学院，广东…广州………510642） 摘  要：从斑节对虾（ ）肝胰腺转录组数据中筛选获得泛素融合蛋白 40基因 Penaeus monodon UbL （ubiquitin/ribosomal…L40…fusion…protein， 40）的部分序列，利用RACE技术克隆其cDNA全长序列，通过 PmUbL 生物信息学进行结构分析；利用实时定量PCR技术检测该基因在斑节对虾不同组织及卵巢不同发育期的表达 情况。结果表明， 40基因cDNA全长571…bp，开放阅读框（Open…reading…frame，ORF）长390…bp，编码 PmUbL 129个氨基酸，预测分子量约14.7…ku，理论等电点为9.76。预测氨基酸序列的N-末端（1～76aa）为高度保守 的泛素结构域，C-末端（77~129aa）为典型的核糖体蛋白L40结构域。多重序列比对表明不同物种的 40 UbL 在进化过程中高度保守。实时定量PCR结果显示PmUbL40基因在肝胰腺的表达量最高，肌肉、卵巢次之，其 他组织的表达较低；在卵巢发育过程中PmUbL40基因在II期表达最高，其次是V期，显著高于I、III、IV期。 研究结果表明PmUbL40基因在斑节对虾卵巢发育过程中可能具有重要作用。 关键词：斑节对虾；泛素融合蛋白L40；卵巢发育；基因克隆 中图分类号：S917；Q786……………………………………………文献标识码：A…………………………………………文章编号：1004-874X（2016）04-0144-07 Molecular characterization and expression profiles of  27 UbS  gene from black tiger shrimp （ ）